西南大学桑资源圃部分桑树品种亲缘关系RAPD分析.pdfVIP

第 34卷 第 2期 蚕 学 通 讯 2014年 6月 NewsletterofSericuituraIScience 1 西南大学桑资源圃部分桑树品种亲缘关系RAPD分析 沈曦彤 李萤 刘玲 张佳钰 范小敏 陈祥平 柯皓天 陈仁芳 (1I西南大学生物技术学，重庆 400716；2．四川省丝绸工程技术研究中心，成都 610031) 摘 要 利用RAPD遗传标记鉴定了西南大学桑资源圃保存的22个桑树品种的亲缘关系。聚 类图首先将新疆药桑分出，将其它 21个品种聚类为两大支、6小支。新疆药桑与其它桑品种亲缘 关系远，大花叶皮桑、盐亭 2O号、国丰、七六一，有较近的亲缘关系；樱桃、多胡早生、收获一、吉木 沙尔黑桑有较近的亲缘关系；金龙、强兵、鹤田、梨儿桑、湖南早生有较近的亲缘关系；油匠当当、姬 鹤有较近的亲缘关系；改良十文字、纳溪桑、民主粉红有较近的亲缘关系；剑持、伊达柴木、马蹄桑 有较近的亲缘关系；大花叶皮桑亲缘关系靠近白桑，瑞穗桑、山桑与白桑、鲁桑有较近的亲缘关系。 未见亲缘关系与地理分布的迁移规律，建议在杂交育种亲本选择时，最好先做亲缘关系分析。 关键词 桑品种 RAPD 亲缘关系 聚类分析 随机扩增片段长度多态性 DNA (Random AmplifiedPolymorphicDNA，RAPD)技术 由 Willams和Welsh等先后于 1990提出l1]。该技术以PCR为基础，可不必预先知道DNA序 列的信息，检测核苷酸序列多态性。RAPD标记技术操作简便、快速、省时、省力、DNA用量 少，在检测桑树亲缘关系，遗传多样性得到广泛应用E3--17]。 西南大学通过两代人努力，在桑树资源圃保存有较多的桑树品种。本文采集梨儿桑等22 份桑树品种，利用 RAPD标记，研究亲缘关系，为桑树品种选育，杂交育种亲本选择提供分子 生物学信息。 1 材料与方法 1．1 材 料 材料采集于西南大学桑树资源圃，所有材料经鉴定后采回(表 1)。 1．2 DNA提取及质量检测 总 DNA提取采用稍加改进 的CTAB(CetylTriethylAmmoniumBromide，十六烷基三乙 基溴化铵)法_1，从约 0．15g的硅胶干燥桑叶中提取 。质量和浓度 ，用Nanodrop2000微量紫 外分光光度计 (赛默飞世尔科技公司))检测确认。 1．3 引物筛选 根据张有做等(1998)、赵卫国等(2000)、付大煦等 (2005)、楼程富等(2002)研究，选取如下 32个引物进行筛选。先用一个DNA样品，初选，再用 4个样品DNA进行第二次筛选，选出 多态性高的引物用于RAPD实验。 * 资助项 目：四川省科技计划项 目(编号 ：2013NZ0048)。 通讯作者：陈仁芳 ，男，博士，副教授 硕士生导师。TelE-mail：crf55@163．com 2 蚕 学 通 讯 34卷 0 4 0 U ” 大花叶皮桑 Moruscathayana 四川 野生 梨儿桑 Morusalba 四川 栽培 纳溪桑 Morusalba 四川 栽培 七六一 Morusalba 重庆 栽培 盐亭 2O号 Morusalba 四川 栽培 收获一 Morusalba 日本 栽培 油匠当当 Morusal