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肉桂酸的合成并利用紫外吸收光谱进行表征（II） 一、什么是紫外-可见分光光度法？ 答：它是利用物质的分子对紫外和可见光的吸收作用，对物质进行定性分析、定量分析及结构分析，所依据的光谱是不同分子吸收入射光中特定波长的光而产生的吸收光谱。称为紫外-可见分光光度法。 二、主要应用: 利用紫外吸收光谱研究有机化合物，尤其是共轭体系很有用。当不同分子含有相同的发色团，它们的吸收光谱的形状就大致相似，所以该法的应用有一定的局限性。但紫外吸收光谱对共轭体系的研究，如根据分子中 共轭程度来确定未知物的结构骨架有其独特的优点，所以紫外吸收光谱是对有机化合物进行定性鉴定和结构分析的一种重要辅助手段。 三、仪器结构： 光源→单色器→吸收池→检测器 可见光区：如钨灯； 紫外光区：如氘灯。 色散元件常用棱镜和光栅。 吸收池又称比色皿，按材料可分为玻璃吸收池和石英吸收池，前者不能用于紫外区。 检测器的作用是检测光信号，并将光信号转变为电信号。现今使用的分光光度计大多采用光电管或光电倍增管作为检测器。 四、仪器操作 （1）打开主机电源，预热15min； （2）进入UV8500操作软件，仪器自检，显示主机状态； （3）进入操作对话框，选择波长扫描； 荧光分光光度法测定维生素C 一、什么是荧光分光光度法： 答：多数分子在常温下处在基态最低振动能级，当荧光物质的分子吸收了特征频率的光能后，由基态跃迁至较高能级的激发态的任一振动能级。处于激发态的分子，与溶剂分子发生碰撞，以热的形式损失部分能量后，而回到第一电子激发态的最低振动能级（无辐射跃迁），通过无辐射去活，将多余的能量转移给其它分子或激发态分子内振动或转动能级后，回到第一激发态的最低振动能级，然后再以光辐射的形式去活化，跃迁回到基态各振动能级，发射出荧光。 二、 为什么要用荧光进行分析呢？ 答：与吸收光谱不同，并不是所有物质都能产生荧光，所以选择性好，干扰少。 三、分析应用： 维生素C（抗坏血酸）具有较强的还原性，在合适的氧化剂存在下，维生素C被氧化成脱氢抗坏血酸，脱氢抗坏血酸与邻苯二胺反应生成有荧光的化合物——喹喔啉。此荧光化合物的激发波长是350nm，发射波长（荧光波长）为433nm，其荧光强度正比抗坏血酸浓度。其反应如下： 四、仪器结构： 激发光源 第一单色器 液槽 第二单色器 检测系统 光源：氙灯， 四、仪器操作 （1）打开主机电源，预热15min； （2）进入FL-Solution操作软件，仪器自检， （3）进入操作对话框，选择测定参数。 五、实验要点及注意事项 1. 注意四通石英比色皿的使用，每换一种溶液须用被测溶液清洗干净。 化学发光分析法测水中Cr3+ 什么是化学发光分析法 答：是利用某些化学反应为能量所产生的光发射现象。在化学发光中，发光物质所需的激发能即不是光，也不是热和电，而是由化学反应过程所提供的化学能。 二、利用化学发光分析法必须具备哪些条件： 答：①能快速释放出足够的能量，一些氧化还原反应，特别是具有过氧化物中间产物的氧化反应可满足此要求。 ②发光持续时间比较长，有利于测量； ③化学发光效率比较高。 二、分析应用： 鲁米诺在碱性溶液中被H2O2、等氧化剂氧化，可产生最大波长为425nm的光辐射。鲁米诺-H2O2化学发光反应能被许多过渡金属离子催化，利用这一性质已建立了Co2+、Cr3+、Cu2+等几十种金属离子的化学发光分析法。且光强与催化离子的浓度成正比。 三、仪器结构： 光检测仪、 流动注射系统 四、仪器操作 （1）打开主机电源，计算机进入IFFM系统，预热15min； （2）建立参数→进样品测量→ 建立新参数（打开参数）→ 选流动注射进样器， 确认→ 高压（300~500V）， 采样速度 20 次/秒 →编辑运行步参数 （3）样品测量 选定参数后 启动 测量→数据读取→谱处理→工作曲线→y=Ax+B 原子吸收光谱法测定水中镁 什么是原子吸收光谱法： 答：基于从光源发出的被测元素的特征辐射，通过试样蒸气时，被同种基态原子所吸收，由辐射的减弱程度求得试样中被测元素的含量。 2．定量测定的依据：朗伯-比尔定律，A=KcL 3．仪器结构：：光源、原子化器、分光器（单色器）和检测器四部分组成。光源——空心阴极灯，作用是辐射待测元素的特征谱线。原子化器——常用的有火焰原子化器和石墨炉原子化器两大类，作用是将试样中待测元素变成基态原子蒸气。分光器——作用是将待测元素的共振线与邻近的谱线分开。检测器——光电倍增管将光信号转换为电信号。 4．仪器操作：（以热电SOLAAR-M6型原子吸收光谱仪为例，岛津AA6300的操作见补充讲义） （1）开主机，开计算机、打开SOLAAR 32软件 （2）开空气压缩机、开乙炔气阀（压力调整在0.05-