抗人F1-F0 ATP合成酶beta亚基单抗的制备及其抗肿瘤活性研究.pdfVIP

· 984 · 中国免疫学杂志 2008年第 24卷 · 肿瘤免疫学 · 抗人F1．F0ATP合成酶 beta亚基单抗的制备及其抗肿瘤活性研究① 张 霞 彭 艳② 俞丽丽 陈建鹤② 王怡波③ 林建波③ 倪 健②④ 殷 明④ 上海交通大学药学院，上海 200240 中国图书分类号 R392．11 文献标识码 A 文章编号 1000-484X 2008 11．O984．05 [摘 要] 目的：制备鼠抗人 F1．F0ATP合成酶 beta亚基 hATP5B 单抗，并对其特异性和抗肿瘤活性进行研究。方法：以 原核表达人 hATP5B免疫 BALB／c小鼠，通过杂交瘤技术，筛选分泌抗hATPSB单抗的杂交瘤细胞株。采用 ProteinA亲和层析 法纯化抗体腹水，SDS 胞MCF-7及其耐药株MCF-7／Adr表面ATP生成 ，细胞毒性实验进行抗肿瘤活性研究。结果：获得一株稳定表达抗hATP5B单 抗的杂交瘤细胞株Mab3B8，Westernblot和细胞免疫荧光结果表明，该抗体与乳腺癌MCF-7及其耐药细胞 MCF-7／Adr细胞天然 抗原结合；可明显抑制MCF-7及其耐药株MCF-7／Adr细胞膜表面ATP合成；与化疗药物多柔比星 曾用名：阿霉素 联合作用， 可降低化疗药物多柔比星对肿瘤细胞的IC50。结论：成功建立了一株可特异性识别天然 hATPSB的单抗 ，