茶多酚的提取方案(正交分解).docVIP

茶叶中茶多酚的提取方案 茶叶中富含一类多羟基的酚类物质, 即茶多酚( T ea Polyphenols, 简称T P) , 它是以儿茶素类( 约占TP 的79% ) 为主体的多酚类化合物; 此外, 还含有黄酮、黄酮苷类、花色素类、酚酸及缩酚酸等 。TP 占绿茶干物质的20% ~ 30%, 具有很强的抗氧化作用和良好的药理作用, 能够高效地抗癌、抗衰老、抗辐射、清除人体自由基、降血糖和血脂。本研究以茶多酚提取产率和含量为指标, 对浸提溶剂浓度、浸提时间、等量氯仿萃取次数、等量乙酸乙酯萃取次数等因素进行比较, 确定绿茶中茶多酚的最佳提取条件, 为茶多酚的工业化提取提供科学依据。 1 材料与方法 1.1 材料与仪器 绿茶、分光光度计、恒温水浴箱、恒温干燥器、过滤及萃取的设备。 1.2 试剂 硫酸亚铁、酒石酸钾钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、乙醇、氯仿、乙酸乙酯等均为优级纯化学试剂。 1.3 茶多酚提取 采用溶剂萃取法, 其原理是根据T P 易溶于水、乙醇、乙酸乙酯等溶剂的性质, 用水或乙醇先将茶多酚从茶叶中提取出来, 用氯仿除去杂质, 再用乙酸乙酯将其从水提物中分离出来,最后将乙酸乙酯回收, 即得到固体的茶多酚, 计算其产率。提取方法见图1。 1.4 正交试验设计及结果 按照上述提取工艺, 经过多次单因子对比试验, 正交试验设计为: 选择浸提溶剂乙醇浓度、浸提时间、等量氯仿萃取次数、等量乙酸乙酯萃取次数等4 个因素,每个因素3水平,见表1。 以茶多酚的产率和含量为考察指标, 用L9( 34) 正交表安排试验, 其结果见表2。 表1 正交试验因素- 水平表( 试验条件) 水平 因素 浸提溶剂浓度( %) A 浸提时间( h) B 等量氯仿萃取次数C 等量乙酸乙酯萃取次数D 1 95 1 1 1 2 80 1.5 2 2 3 60 2 3 3 表2 正交试验设计及结果 A B C D 产率( %) 含量( %) 1 1 1 1 1 2 1 2 2 2 3 1 3 3 3 4 2 1 2 3 5 2 2 3 1 6 2 3 1 2 7 3 1 3 2 8 3 2 1 3 9 3 3 2 1 产率( %) K1 E = E = K2 K3 R 含量( %) K1 K2 K3 R 1.5 茶多酚含量的测定 准确称取所制得的茶多酚粉末0.1g,加入蒸馏水,完全溶解,定容至100 mL 水溶液备用。准确吸取1.00 mL上述备用溶液置于25 mL 的容量瓶中,加水4mL、酒石酸亚铁溶液5mL,然后加pH 7.5的磷酸盐缓冲液稀释至刻度。用蒸馏水做空白对照,用1cm比色皿,在波长540nm 的条件下,用分光光度计测出其吸光度,计算出茶多酚的含量。 表3 提取产率正交试验方差分析 来源 平方和(S S) 自由度( DF） 均方和( MS ) F1) p 显著性 A B C D 表4 茶多酚含量正交试验方差分析 来源 平方和 (S S) 自由度 ( DF) 均方和 ( MS ) F1) p 显著性 A B C D