蛋白质的提取和分离.docVIP

富县高级中学集体备课教案 年级：高三 科目：生物 授课人： 课 题 蛋白质的提取和分离，PCR技术 三维目标 （一）知识与技能 1、了解PCR技术的基本操作 4血红蛋白的提取和分离的实验原理 2、理解PCR的原理 3、讨论PCR的应用 （二）过程与方法 在多聚酶链式反应扩增DNA片段的实验过程中，应避免外源DNA污染，严格控制温度等反应条件 （三）情感、态度与价值观 通过对PCR实验的操作，血红蛋白的提取及结果分析，培养学生严谨的科学态度和实事求是的科研精神 重 点 PCR的原理和PCR的基本操作 中心发言人 吉延玲 难 点 教 具 投影、多媒体课件 课 型 复习课 课时安排 -3-课时 教 法 实验原理分析法、讨论法、比较法、归纳法等。 学 法 讲述与学生练习、讨论相结合 个人主页 第一学时 课本基础知识复习 教师引导学生复习课本基础知识 一 提取和分离各种蛋白质 原理：蛋白质的物化理性质：形状、大小、电荷性质和多少、溶解度、吸附性质、亲和力等千差万别，由此提取和分离各种蛋白质 1.蛋白质的分离与纯化 （1）实验原理：依据蛋白质的各种特性将不同种类的蛋白质分离，再依据蛋白质之间以及蛋白质与其他物质之间的差异进行纯化。 （2）步骤 ①样品处理：选择不同的破碎细胞的方法，将样品进行机械破碎； ②粗分离：依据蛋白质的不同特性，选择不同的溶剂进行抽提； ③纯化：采用透析法、离心沉降等方法进行纯化； ④纯度鉴定。 （3）电泳 ①概念：带电颗粒在电场作用下向着与其电性相反的电极移动的现象。 ②原理：利用待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形状的不同使带电分子产生不同的泳动方向和速度，从而实现样品中各种分子的分离。 ③泳动的特点：带电颗粒直径越小，越接近于球形，所带净电荷越多，在电场中泳动速度越快；反之，则越慢。 二 生物体内DNA复制 PCR反应 教 学 过 程 ? 生物体内DNA复制 PCR反应 解旋 在解旋酶作用下，利用细胞提供的能量，DNA双链部分解旋 加热至90 ℃以上，双链全部解旋，不需解旋酶 引物 一小段RNA 可以是RNA或单链DNA分子片段 合成子链 在引物基础上，一条链连续合成，另一条链不连续合成 分别从两条链的引物端开始，都是连续合成，控制温度在72 ℃左右 特点 边解旋边复制，半保留复制 体外迅速扩增 Taq DNA 聚合酶 不需要 需要 循环次数 受生物体自身控制 30多次 相同点 生物体内的DNA复制和PCR反应中都需要模板、四种脱氧核苷酸，且都需要在一定的缓冲溶液中进行 相同点 生物体内的DNA复制和PCR反应中都需要模板、四种脱氧核苷酸，且都需要在一定的缓冲溶液中进行 1.基本原理：该技术是在模板DNA、引物和四种脱氧核苷酸都存在的情况下，依赖于Taq聚合酶的酶促合成反应。Taq聚合酶以单链DNA为模板，借助一小段双链DNA来启动合成，通过一种或两种人工合成的寡核苷酸引物与单链DNA模板中的一段互补序列结合，形成部分双链。在适宜的温度和环境下，Taq聚合酶将脱氧核苷酸加到引物3′端，并以此为起始点，沿模板5′→3′方向延伸，合成一条新的DNA互补链。 2.PCR扩增 （1）参与的组分及作用 参与的组分 在DNA扩增中的作用 DNA母链 提供DNA扩增的模板 4种脱氧核苷酸 合成子链的原料 Taq聚合酶 催化合成DNA子链 引物 使Taq聚合酶能够从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸 Mg2+ DNA聚合反应所需的离子条件 第二课时 考点清障 师生共同复习考点知识 本学案的知识点有从生物材料中提取某些特定成分，PCR扩增的基本原理、操作和应用，蛋白质的提取和分离。在高考中常以材料情景题考查PCR技术的原理、操作步骤，常以实验设计的形式考查芳香油提取的操作流程及注意事项。 1重点在于知识的归纳，梳理，识记。 补充：PCR技术中的引物及其作用 引物是指能够与DNA母链的一段碱基序列互补配对的一小段单链DNA或RNA。由于DNA聚合酶不能从头开始合成DNA，而只能从3′端延伸DNA链，因此DNA复制需要引物。 2根据考点引导学生做相应的高考真题。 3 具体见资料。 第三课时 习题讲解 1学生课前认真做题。 2 教师课堂分析，引导学生归纳方法。 3课后学生反思 4 本单元知识结构 教学反思