项目一动物组织中核酸的提取与鉴定.pptVIP

项 目 一 动物组织中 核酸的提取与鉴定 一、实验目的 学习和掌握用盐溶法从动物组织提取核酸的原理和操作技术。 了解定性鉴定核酸的原理和方法。 二、实验原理 根据核糖核蛋白与脱氧核糖核蛋白在一定浓度的氯化钠溶液中的溶解度不同进行分离，然后用蛋白质变性沉淀剂去除蛋白，使核酸释放出来，再利用核酸不溶于乙醇的性质将核酸析出，达到分离提纯的目的。 三、实验材料 试剂 地衣酚（orcinol）试剂： 称取100mg地衣酚溶于100ml 浓盐酸中，再加入100mgFeCl3·6H2O，该溶液应在使用前新鲜配制。 二苯胺试剂： 称取1g二苯胺（经重结晶）溶入100ml冰醋酸中，再加入2.75ml浓H2SO4摇匀，冰箱内保存备用。 三、实验材料 试剂 0.14mol/L氯化钠溶液 （内含0.01mol/L柠檬酸），250ml； 1mol/L氯化钠溶液，250ml； 95%乙醇（冷）； 氯仿； 异戊醇。 三、实验材料 实验器材 冷冻离心机（3000rpm）； 组织捣碎机或组织匀浆器； 不锈钢剪刀； 冰浴； 试管、试管夹； 量筒、吸管； 带塞比色管、带塞离心管。 玻棒、烧杯； 电炉等。 四、实验方法 1. 制匀浆 将新鲜肝脏或冷冻肝脏称重后用冷的0.14mol/L氯化钠溶液（内含0.01mol/