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香樟的提取液对体外大肠杆菌抑菌作用 不同浓度的香樟提取液对同种大肠杆菌的抑制作用 上师大附中 姜雨宁、林圆、刘畅、刘晓越 辅导老师：张岳梅 【摘要】 大肠杆菌是一种容易大量繁殖的细菌，并且有可能引起一系列的病症例如：腹泻等，本文通过探究不同浓度香樟提取液对同种大肠杆菌的抑制作用的研究，为大肠杆菌的抑制作用提供一种有效的思路，为日后更进一步的科学研究提供了基础。 【关键字】 大肠杆菌 天然提取液 【选题由来】 在经过一系列的资料查找后，我们认为要用一种日常植物（食物）的提取液来研究对体外大肠杆菌的抑制作用，在上海，香樟是大量种植的也成为一种常见的植物，并且通过查找资料，发现香樟历来可以治疗痢疾，因此我们想系统研究一下，香樟提取液的具体作用。 【实验材料】 酵母提取物，PH-5α大肠杆菌、蛋白胨、食盐、琼脂、水、香樟叶 【实验方法】 使用电子天平称取酵母提取物0.5g（实际精确值0.495g）。蛋白胨1g (实际精确值0.995g)，食盐1g（实际精确值0.9933g） ，琼脂1.7g（实际精确值1.699g），水100ml (误差在0.01内) 在烧杯内加水溶解逐次加入蛋白胨，酵母提取物，食盐。配制成为LB酵母提取物培养基。 用pH试纸测定pH值，调节pH值，逐滴滴入氢氧化钠溶液，用pH试纸测定溶液至7 将溶液装入锥形瓶内，加入琼脂，摇匀。 加上牛皮纸，用绳子绑好。 用高压蒸汽灭菌法灭菌并使培养基中的琼脂熔化。（1.05kg/cm2, 15磅/inch2 121.3摄氏度）。 3. 将装有大肠杆菌的锥形瓶放入人工气候箱中复苏。温度37.4摄氏度，湿度46。 4. 取出灭菌后的培养基，在超净工作台中将冷却至50摄氏度左右（手可以触摸）的培养基倒入三个培养皿中，注意用酒精灯消毒，制成厚度2mm制成平板。平放，等待凝固。 5. 制浸提液：将30g香樟叶加60ml水用研钵研碎制成渣。通过过滤获得溶液。 6. 将复苏的大肠杆菌，接种到液体培养基中，制成菌悬液。 7. 取0.3ml菌悬液涂布接种在培养基上。 8. 将浸泡的药片放在培养皿上。 9. 将培养皿放入人工气候箱中培养，定时观察抑菌圈。 【实验一】 1、实验：滤纸浸泡在同一时间同一温度下，不同浓度的香樟提取液中。 浓度(原=30/(30+60)=33%) 高 中 低 33% 17% 11% 浸泡时间 1小时20分钟 2、将滤纸放置在已经徒步接种过的平板上。 3、在19小时的浸泡后，形成抑菌圈。 高浓度 中浓度 低浓度 实验序号/抑菌圈直径(cm)/浓度 高 中 低 1 1.8 1.8 不明显 2 1.5 1.8 不明显 3 1.6 1.7 不明显 平均值 1.63 1.77 不明显 【实验二】大肠杆菌的观测 在 显微镜油镜的观测下，图中圈出为大肠杆菌。 【实验结果及讨论】 1. 从实验中可以看出在中浓度下（17%）香樟提取液对大肠杆菌的抑制作用最强；高浓度（33%）香樟提取液对大肠杆菌的抑制作用较强，低浓度下（11%）抑制作用不明显。 2. 香樟提取液对杀灭大肠杆菌有抑制作用，但我们的实验结果表明并非浓度越高抑制作用越明显。 3. 通过实验我们可以设想将香樟提取液用于医药生产，治疗痢疾等由大肠杆菌引起的肠道性疾病。 4. 还可以使用与香樟同类的植物提取液来进一步研究其他天然植物对大肠杆菌的抑制作用。 5. 我们需要进一步研究香樟叶中的哪些成分对大肠杆菌有抑制作用。 【收获与反思】 本次实验我们研究了香樟的提取液对大肠杆菌的抑制作用。我们通过做实验，学会了运用许多精密仪器，如高压杀菌锅，我们也了解了科学研究的步骤，更重要的是我们感受到了科学精神的严谨和宝贵，比如在制取溶液时量取溶剂时精确到0.01。 实验结果与我们预想的有差距。可能是因为我们有数据上的误差，做香樟提取液时，有残留在研钵上的叶渣未加入，且我们的提取液不是原液而是加了水的溶液。 【参考文献】 1．《中草药对大肠杆菌体外抑菌试验?来源：鸡病专业网?? 作者：安徽技术师范学院6种中草药抗耐药性大肠杆菌的抑菌效果作者：黄衍强，黄宏思，张莲，林丽霞，黄荃荃，甘江丽，蓝文清，梁思武??