基于DPO的四重荧光PCR检测常见分枝杆菌方法的建立应用.pdfVIP

第三届佳染病防控基础研究刍应用技本i金坛 基于DPO的四重荧光PCR检测常见分枝杆菌方法的建立与应用 陈光吴盛海‘余道军徐丽慧范大鹏王贤军 基金项目：杭州市科技计划项目(20100633804) 作者单位：310016浙江大学附属邵逸夫医院检验科(陈光)；310006杭州市第一人民医院 检验科(吴盛海，余道军，徐丽慧，王贤军)：杭州市红十字会医院实验室(范 大鹏) 通讯作者：吴盛海，chenguanghai2001@yahoo．com．an 【摘要】目的利用多重荧光PCR技术，建立一种快速、准确、特异检测常见 分枝杆菌的方法。方法以分枝杆菌16SrRNA作为检测靶基因，设计DPO引物和 标记Eclipse。通过对4种分枝杆菌标准株基因组DNA的扩增，评价多重荧光PCR 方法的特异性和敏感性。同时检测一定数量临床样本，结果与常规方法进行比较。 结果该方法可准确、特异地鉴定结核分枝杆菌和三种常见非结核分枝杆菌，检 测敏感性均为1×lOlcfu／ml。同时对68例痰液标本进行检测，结果显示3l例 检测结果阳性，阳性率45．6％。明显高于涂片染色镜检，差异具有统计学意义 (PO．05)。其中28例为结核分枝杆菌，1例为鸟分枝杆菌，2例为胞内分枝杆菌，