三甲双酮对斑马鱼胚胎早期发育的影响.pdfVIP

逢 HEREDITAS(Beijing)2012年9月，34(9)：1165--1173 ISSN0253-9772 WWW．chinagene．CR 研究报告 DoI：10．3724／SP．J．1005．2012．01165 三 甲双酮对斑马鱼胚胎早期发育的影响 秦伟，胡 占英，佟军威，孟杰，游雪甫，张靖溥 中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所药理室，北京 100050 摘要：针对抗癫痫药物的临床神经性毒副作用及致畸性，以三甲双酮为探针药建立了抗癫痫药毒性的斑马鱼 胚胎模型。结果显示，斑马鱼胚胎暴露于三甲双酮后出现浓度依赖性的畸形和死亡。畸形表型有生长迟缓，脑 区、眼和听囊变小，半规管和耳石受损，以及心血管系统异常。这些表型与临床病例和文献报道很相似。毛细 胞染色显示听囊 ML2神经丘毛细胞数明显减少。原位杂交检测发现脑标志基因 zicl和 xb51、自噬基 因atg5 的表达 图式发生了异常变化。RT-PCR检测显示听觉基因val和 hmx2的表达水平也发生了异常变化。这些结 果提示脑组织和控制身体平衡及听力的神经感受器是三甲双酮的主要毒性靶位。斑马鱼胚胎和幼体可以模拟三 甲双酮对哺乳动物的致畸和神经毒性反应。 关键词： 三甲双酮；药物毒性；斑马鱼；胚胎发育；听囊；基因表达 Toxiceffectsoftrimethadioneonzebrafishearlydevelopment QINWei，HUZhan-Ying，TONGJun—Wei，MENGJie，Y0UXue—Fu，ZHANGJing-Pu LaboratoryofPharmacology，InstituteofMedicinalBiotechnology，ChineseAcademyofMe~calSciencesandPekingUnionMeScal College，Bejiing100050，China Abstract： Tofurtherunderstandtheneuraltoxicityandteratogenicityofantiepilepticdrugsinclinic，weestablisheda zebrafishmodelforantiepileptictoxiciytusingtrimethadioneasaprobedrug．Theresultsindicatedthatembryonicmalfor— mationoccurredundertrimethadionetreatmentinaconcentration-dependentmanner．Thedefectsincludedgrowthretarda— tion，smallhead，eyesandacousticcapsule，deficientsemicircularcanalsandotolith，na dabnormalcardiovascularsystem ． ThenumberofhaircellsinneuromastML2wasobviouslyreducedintherteatedlarvae．W holemoun tinsituhybridization indicatedthatthegeneexpressionpaaemsofbrainmarkergenes，suchasziclandxb51，nadautophagicgeneatg5was changedsignificantly．TheresultofRT-PCR showedthattheexpressionsofhearinggenesvalandhmx2werealsochna ged inhtetrimethadione-treatedembryos．Allthesefindingssuggestthatbraintissuena dtheneuralsensorsforboaybalance na dhearingarethemaintargetsoftrimethadionetoxicity，andthatzebrafishisabletomimicmammalresponsestothe teratogenicityandtheneuraltoxiciytoftrimethadioneintheembryonicandlarvadevelopment． Keywords：Trimethadione；drugtoxicity；zebrafish；embryonicdevelopment