中药清毒栓对宫颈癌SiHa细胞p53泛素化降解途径的实验的研究.pdfVIP

可能机制。冬连组： 待进一步研究。 中药清毒栓对宫颈癌SiHa细胞 p53泛素化降解途径的实验研究 楼姣英 于妍妍 金 哲 北京中医药大学东方医院妇科 前言 宫颈癌是最常见的女性恶性肿瘤之一，约占女性恶性肿瘤的25％，是目前人类所有癌症中唯一 病因明确的癌症，唯一可以预防的癌症。大量研究发现高危型HPV16、HPV18的某些亚基因结构是富 颈癌发病及发展的癌基因。在一定条件下与某些因素协同作用而引起组织细胞异型性变，最后导致 恶性转化，发生癌变。抗癌基因的失活与癌基因的激活参与人类各种肿瘤的形成和发展，在抗癌基 因p53、p21、p27、Rb中，由于人类恶性肿瘤中至少有50％发生了p53基因的变化，因此其最受瞩目。 目前西医对HPV感染引起的宫颈病变没有特效的预防和治疗药物。中医药在治疗女性生殖道HPV感染 方面取得了一定的成。本文旨在探讨中药在抗p53泛素化降解途径方面的作用机制。以进一步明确中 药在 HPV相关宫颈癌细胞中的抗病毒、抗肿瘤机制。 北京中医药学会2012年度学术年会论文汇编 三、We8tern—BIot法测蜀富HPVl6E6、p53、UBcH8 E6一AP的含量用细胞刮子分别收集以4％浓度不同含药血清培养液作用72h的宫颈癌SiHa细胞的 法测定蛋白含量后，将剩余蛋白样品加入等体积上样缓冲液，沸水中煮5min。制胶后上样，以电泳 缓冲液冲洗加样孔数次。分别将处理好的809各组蛋白样品按照预定的顺序加入浓缩胶的上样孑L内。 经过电泳及转膜、封闭，封闭结束后，将膜移入杂交袋中，加入用适当漂洗液稀释的一抗(E6一AP为1： 度分析。 四、统计学方法 所有检测数据采用SPSSl2．0软件包进行统计学处理，采用单因素方差分析。 结果 一、4％含药血清作用不同时间细胞生长及增殖情况 各血清药组与空白血清组比较均出现活细胞数量减少(PO．05)，各组含药血清在各时间点对 SiHa细胞均有抑制作用，尤以72h为显著，与空白血清组比较差异有统计学意义(P0．01)。安达芬 组抑制作用最强，清毒栓组次之，再次为保妇康组；但清毒栓组与安达芬组比较，差异有统计学意 义(PO．05)，而与保妇康组比较，差异无统计学意义(PO．05)。见表l。 裹1 4％含药血清作用不同时问细胞生长及增殖情况(oD值，牙±s) 组 别 N 细胞生长时间 24h 48h 72h 正常对照组 6 0．381±0．012 0．468±0．0140．641±O．034▲ 空白血清组 6 O．374±O．057 0．446±O．0220．620±0．013▲ 清毒栓组 6 O．303±0．044木 0．4ll±0．015木O．544±0．015幸 保妇康组 6 0．304±0．031宰 0．421±0．009木0．564±0．02l木 6 0．368±0．048lc0．398±O．008，lc 干扰素组 0．496±0．022木▲ 与空白血清组比较， PO．01；与清毒栓组比较，▲P0．05 =、含药血清作用72h后各组HPVl6E6、p53、UBcH8、E6一AP蛋白表达比较 各组含药血清与空白血清组比较，船V16E6、E6咱P的表达量均降低，以清毒栓组最佳，安达芬 升高最多，清毒栓组次之，但清毒栓组与安达芬组比较无统计学意义。见表2、图1。 与空白血清组比较， P0．01；与清毒栓组比较，▲P0．05