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- 2017-08-08 发布于河南
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维生素B7(生物素)检测试剂盒实验操作流程
一、实验前准备工作
1、灭菌(在做实验前,至少提前两个小时以上灭菌)
实验器材名称 规格 数量 黄色吸头 20-200ul 200个 蓝色吸头 100-1000ul 200个 带塞可离心试管 50ml 至少是当次检测样品数量 离心管 1.5-2.0ml 100个 注射器 至少比当次检测样品数量多2个 如果有一次性无菌注射器则不需要灭菌注射器
没有枪头盒时用其他器皿装枪头一起灭菌(如烧杯,灭菌时放入枪头后用报纸把烧杯口封起来),同时带两把小镊子,做实验时取枪头用。
2、配制溶液
(1)准备10mlHCL溶液:1.0mol/l
(2)配制氢氧化钠溶液:1mol/l
a)称取0.4 g 氢氧化钠
b)用10 ml双蒸水或去离子水充分溶解
注:用带橡胶塞的玻璃瓶储存。
3、实验过程中需要的其他设备及器材:
无菌工作台
酶标仪(540nm或630nm)
37℃黑暗条件下的培养箱
95℃水浴锅(实验前需要提前加热到95℃)
振荡器
pH测量仪或pH试纸
双蒸水
0.2um无菌滤膜
酒精棉
二、样品处理
1、称取1g奶粉样品至一个50ml无菌试管中,加入40ml无菌水摇匀,用HCL或NaOH调整pH值到8.0 +/- 0.2,充分混匀;
2、在95℃水浴中提取30分钟,期间所有样品试管需每隔5分钟振荡一次,并一直保持试管塞紧闭
3、迅速冷
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