油红O及苏丹黑B对重度脂肪肝组织脂质染色效果的比较.pdfVIP

· 218 · 临床与实验病理学杂志 JClinExpPathol2012Feb；28(2) 介绍一种 HPV检测的石蜡组织取样方法 杨月红 ，袁静萍 ，袁修学 ，罗 波 关键词：人乳头状瘤病毒；石蜡组织；取样 1 材料与方法 中图分类号：R361+．2 文献标识码：B 文章编号：1001—7399(2012)02—0218—02 1．1 材料 无菌手术刀和无菌镊子各 1把 、1．5mlEP管 1 支，武汉市中心医院待检组织石蜡包埋块、待检组织 HE切 现已证实，部分高危型HPV感染具有潜在致癌性，能引 片、裂解液。 起外生殖器癌、宫颈癌及高度子宫颈上皮内瘤。低危型 1．2 方法 在显微镜下对待检组织的HE切片选择镜下特 HPV主要引起肛门皮肤及男性外生殖器、女性大小阴唇、尿 征为鳞状上皮具有HPV感染迹象的部分(即有挖空样细胞 的部分)，比照切片在石蜡块上选定待测组织范围(图1)，在 道 口、阴道下段的外生性疣类病变和低度子宫颈上皮内瘤。 石蜡块选定部位用无菌解剖刀将组织平削下约10 m厚组 目前，HPV分型的检测方法主要有杂交法和以聚合酶链式 织 ，尽量少削组织周围的石蜡 ，削下的组织用无菌镊子置于 反应 (polymerasechainreaction，PCR)为基础的两大类 J。 无菌的1．5ml离心管底部。若组织较大 ，可用镊子将组织 临床检测大多选择PCR法。在 PCR检测 中，取样一般为黏 夹碎 ，加入 3O一50 l裂解液，裂解液的量以能盖住组织为 膜生殖道病变上皮层细胞或皮肤疣状物上皮刮取物，用棉签 宜。100℃水浴加热 10min后立 即以13000r／min离心 5 或无菌小毛刷轻拭病变部位即可采集到足够的脱落细胞做 min。离心管内的液体经离心后肉眼可见分成3层：上层为 DNA提取 。在基础研究和I临床研究中常常需要用皮肤或 凝固的石蜡层 ，中间为实验所需的DNA溶液，下层为组织碎 宫颈的石蜡组织做 HPV检测，在检测 中对石蜡包埋组织取 片(图2)。取样时先将加样器按下，沿管壁用 TP头轻轻捅 样大多数采用切片机切片，有的将组织切成小卷装在EP管 开石蜡层取中层DNA溶液待用。 中，有的将切好的组织裱贴在玻片上 ，然后经过脱蜡等过程 2 结果 处理后才能进行组织 DNA的提取 ，过程繁琐，还容易造成样 本的污染。现介绍一种简单方便的石蜡组织取样方法。 我们采用此方法对病检结果为宫颈 CIN2级以上和尖 锐湿疣的61例宫颈、皮肤组织的蜡块取样 ，用反向点杂交基 收稿 日期：2011—11—14 因芯片技术检测 HPV基 因型。结果统计，除有 1例组织 作者单位：武汉市中心医院病理科 430014 HPV检测为阴性外 ，其余均为高危型或低危型HPV阳性 ，符 武汉科技大学医学院基础医学部 430065 合率达98．3％。对该例标本进一步分析：这是一小块包皮 作者简介：杨月红，女，副主任技师。Tel：(027 组织蜡块，HE切片病理镜下特征为鳞状上皮呈乳头样生长， 袁静萍，女，硕士，副主任 医师，通讯作者。Tel：(027)