竞争性抑制酶联反应在量热式农残生物传感器中的试验研究.pdfVIP

第43卷第8期 东 北 农 业 大 学 学 报 43(8)：25-29 2012年8月 JournalofNortheastA culturalUniversity August2012 竞争性抑制酶联反应在量热式农残生物传感器中的试验研究 NguyenVan—luc，于劲松，徐 斐 ，华泽钊 (上海理工大学食品安全研究所，上海 200093) 摘 要：以量热式农残生物传感器为研究对象，借鉴免疫分析方法，进行竞争性抑制酶联反应在量热式农残生 物传感器中的试验研究。结果表明，在甲胺磷浓度为0~0．OO4mg·kg范围内，甲胺磷含量和放热量之间的线性较 好，竞争l生抑制酶联反应分析法测农药残留的最低检测限为0．0011mg·kg-，每次测定时间为20min。 关键词：酶标农药；鸡肝酯酶；量热式酶传感器；竞争性抑制酶联反应 中图分类号：TS201．6 文献标志码：A 文章编号：1005—9369(2012)08—0025—05 Researchofthermalpesticidebiosensorinthemethodofcompetitiveinhibi- tionofenzymereactions／NGUYENVan-luc，YUJinsong，XUFei，HUAZezhao(InstituteofFood Safety,UniversiytofShanghaiforScienceandTechnology,Shanghai200093，China) Abstract：Drawing on immunoassaymethods，thepreliminarytestofthermalbiosensorwas researchedinthe method ofcompetitive inhibitionofenzymereactions．The results showedthat，at concentrationof0-0．004 mg ·kg。。ofmethamidophos。there isgood linearitybetweenmethamidophos oc ntentandheatrelease．Thelimitofdetectionofcompetitiveinhibitionofenzymereactionsmethodis 0．0011mg·kg一．andthemeasurementtimeisabout20minutes． Keywords：enzyme—labeledpesticides；liveresterase；thermalbiosensor；competitiveinhibitionof enzymereactions 作为广谱高效的有机磷杀虫剂，甲胺磷 (Me— 量很小，测量困难 ；而免疫分析法中的氧化还原 thamidophos，MTD)曾广泛用于世界各地 。由于 酶类的放热量虽大，但制备单克隆抗体的成本较 其对哺乳动物的高毒性以及其长期残留性，近年来 高 。因此，可参考以上两种方法，基于酯酶一农药 各国家对于甲胺磷的使用有严格的限制，甚至禁止 抑制剂之间的结合和免疫学中的抗体一抗原结合都是 使用于蔬菜及水果。但是由于违禁使用 甲胺磷而导 特异性原理，将酯酶做抗体，将农药作抗原，利用 致的食品安全事件仍时有发生，因此有必要建立适 葡萄糖氧化酶(Glucoseoxidase，GOx)等氧化还原酶 用于现场检测的快速、便捷的检测方法u。目前，农 来标记农药，制得酶标农药，并使酶标农药与待测 药残留快速检测主要基于酶抑制或免疫分析原理， 农药竞争l生地与酯酶发生抑制结合反应(见图1)，从 结合光度法，以吸光度值作为指标，通过测定固定 而获得较大的反应热，便于采用量热方法来快速检 于载体上的残余酶活性或标记在抗体上的酶活性来 测农药残留。