15.真核生物基因表达调控2课时.ppt

* * 目 录 一、染色质转录水平调控 二、DNA转录水平调控 三、转录后水平调控 四、翻译水平调控 五、翻译后水平调控 六、RNA调控 一、染色质转录水平调控 1、活性染色质的发现 易被DNAaseI降解的染色质称活性染色质。 鸡血红细胞中DNAaseI对成体?-球蛋白基因降解高敏感，称活性染色质；但对胚胎?-球蛋白基因较敏感，对卵清蛋白基因不敏感。 鸡输卵管细胞中DNAaseI对卵清蛋白基因高敏感，?-球蛋白基因不敏感 从而可见，因时间或器官(空间)不同，DNAaseI易降解染色质部位也不同，这种敏感性区间称为活性染色质。 胚胎?-球蛋白基因 成体?-球蛋白基因 卵清蛋白基因 鸡血红细胞DNAaseI降解 2、活性染色质特点 一、染色质转录水平调控 活化基因都处于染色质伸展状态，称活性染色质，有4个特点： ⑴乙酰化程度高，乙酰基转移酶(HAT)活性强 组蛋白N端乙酰化利于DNA酶攻击、转录因子结合和核小体重朔。 组蛋白N端乙酰化能与调节蛋白结合。与赖氨酸调节蛋白结合的结合域，称溴基域。 组蛋白N端乙酰化是可逆的，其N端乙酰基能被脱乙酰基酶移走。 2、活性染色质特点 ⑵组蛋白甲基化差异大：活性基因组蛋白内的精氨酸甲基化有利于基因转录，但H4和部分H3组蛋白赖氨酸甲基化会抑制基因转录。 ⑶ H2B组蛋白磷酸化程度低， H2A组蛋白富集明显。 ⑷ H1与活性染色质结合不紧。 一、染色质转录水平调控 3、核小体重朔与转录起始 一、染色质转录水平调控 ①染色质重朔因子借助ATP水解能量接近核小体 ②TATAbox序列上的8聚核小体解聚为H2A-B和H3-H4四聚体,暂时移开 ③转录因子和RNA聚合酶Ⅱ在TATAbox上形成起始复合体转录基因 ④RNA聚合酶离开后，恢复核小体结构，出现puf。 4、染色质修饰与组蛋白密码 一、染色质转录水平调控 ①组蛋白N端从DNA缠绕的核小体中伸出的氨基酸上乙酰化或甲基化，改变了核小体构象或性质 ②据组蛋白修饰酶的专一性,可构建出组蛋白传码密遗子；称第二部遗传密码 ③组蛋白密码能影响基因活性，能被组蛋白修饰酶阅读，调节基因活性和表达。 1、DNA甲基化与基因活性 DNA中C被甲基化形成5`甲基胞嘧啶(mCpG)，是脊椎动物转录调控的重要途径。活性基因DNA甲基化多为30%,非活性基因为80%。 DNA甲基化作用有3： ①防止限制酶剪切，未甲基化CCGG序列易被剪切 ②强化非活性状态，X染色体失活是C全被甲基化 ③降低转录效率，活跃基因甲基化比正常低30% 二、DNA转录水平调控 (一)DNA修饰与转录水平调控 二、DNA转录水平调控 (一)DNA修饰与转录水平调控 2、亲本印记(parantal imprinting)与转录水平调控 父母亲染色体甲基化程度不同，基因的活性也不同，后代出现单亲传递现象为之。又称基因组印记(genomic imprinting)。 小鼠类胰岛素基因igf2与H9基因之间有一个印记区，当染色体甲基化后H19失活，仅表达父igf或母H19。 二、DNA转录水平调控 (一)DNA修饰与转录水平调控 3、基因印记形成步骤 印记基因并非编码在DNA序列中，靠配子形成时DNA或染色质表观变化。 基因印迹过程有三个阶段： ①印记删除：印迹删除发生在原始生殖母细胞形成过程之中，受孕9-21周。 ②印记重建：印记重建发生在配子形成过程之中，受孕21周-性发育成熟。 ③印记维持：母系基因印迹时父系等位基因会表达；父系基因印迹时母系等位基因会表达。印记维持是发生在胚胎和个体的整个时期。 二、 DNA转录水平调控 5’ A B 3’ 1 3 2 CAAG box TATA box 翻译起始 翻译停止 TAA/TAG/TGA 加 Poly (A) 信号 加帽，转录起始 信号肽序列 1,、2、 3：外显子 A、B ：内含子 DNA上对基因活性有调节作用的特定序列 包括：LCR位点调控； 启动子调控； 增强子调控 转录起始调控； 信号肽调控； 激素调控等 （二）顺式调控(cis-regulation) 1、顺式作用元件(cis-acting element) RNA聚合酶结合位点,位于结构基因起点前，5’端上游100bp内 TATAbox： -100bp，RNA酶识别、结合位点，有-32～-25bp产品 TTGACAbox：-35bp，σ因子识别、结合位点 间隔序列：序列内容不重要，数目＜15或＞20均影响转录活性。 ⑴原核生物启动子 二、 DNA转录水平调控 （二）顺式调控(cis-re