跨膜型TNF2α细胞毒作用与其功能域的关系①.pdfVIP

α 郑　芳等　跨膜型 TNF 细胞毒作用与其功能域的关系　第 4 期 2·25 · ·分子与细胞免疫学· ① 跨膜型 TNFα细胞毒作用与其功能域的关系 ② 郑 　芳 　李卓娅 　龚非力 　姜晓丹 　熊 　平 　冯 　玮 　徐 　勇 (华中科技大学同济医学院免疫学教研室 ,武汉 430030) 　　中国图书分类号 　R39211 　　文献标识码 　A 　　文章编号 　1000484X( 2003) α( α) α [摘 　要] 　目的 :探讨跨膜型 TNF TMTNF 的细胞毒作用及其功能域的关系。方法 :采用重组 PCR 对 TMTNF 基因进 行定点突变 ,在微粒体膜的存在下体外转录、翻译突变体 ,并观察这些突变体的胞毒作用。结果 :通过重组 PCR 分别获得 TM α α TNF 第 - 71 、31 、35 、87 、95 、143 与 147 位氨基酸置换的突变体 ,这 7 种突变体对 L929 细胞系的细胞毒作用 ,与野生型 TMTNF α α 相比 :第 - 71 、143 位氨基酸单个置换使 TMTNF 胞毒作用下降 4 倍以上 ,35 、95 、147 位单个置换使 TMTNF 胞毒作用下降 α 15～25倍 ;而第 31 、87 与 133 位氨基酸突变则对 TMTNF 杀伤作用无影响。结论 : 除 - 71 位氨基酸外 , 以上6 个位点的氨基 α( α) α α 酸均参与分泌型 TNF STNF 的胞毒功能 ,提示 TMTNF 和 STNF 发挥细胞毒功能的功能域可能不完全相同。 α [ 关键词] 　跨膜型 TNF ;受体 ;点突变 ;胞毒效应 ;功能域 The relationships between structure and function of human transmembrane tumor necrosis factorα ZHENG Fang ,LI ZhuoYa , GONG FeiLi et al . Department of Immunology , Tongji Medical College , Huazhong University of Science and Technology , Wuhan 430030 , China ( α) [ Abstract ] 　Objective :To determine the region of human transmembrane tumor necrosis factoralpha TMTNF ,essential for cytotoxic α ( ) activity against mouse L929 cel