冻融后2-细胞胚胎发育至囊胚建立人胚胎干细胞系.pdfVIP

第32卷第 23期 第 三 军 医 大 学 学 报 Vo1．32．No．23 2568 2010年 l2月 15日 ACTA ACADEMIAE MEDICINAE MILITARIS TERTIAE Dec．15 2010 辩穗粪 文章编号：1000-5404(2010)23—2568．03 冻融后2一细胞胚胎发育至囊胚建立人胚胎干细胞系 杨 华。，刘 锋 ，王 钦 ，邓志华’，邹 彦 ，史秋雯 ，丘 映 ，李东升 (530031南宁，广西壮族自治区南宁市第 二人民医院生殖医疗中心 ；442000湖北 十堰，湖北省太和医院郧阳医学院胚胎干细胞重点实验室 ) [摘要] 目的 用解冻后废弃胚胎及部分患者捐献的冷冻胚胎建立胚胎干细胞系。方法 用程序解冻法解冻 2001—2007年来我生殖中心就诊的患者剩余冷冻胚胎，培养至囊胚 ，Pronase酶去除透明带后，全囊胚置于小鼠饲养层 (MEF)中培养获得原代细胞，机械法结合Ⅳ型胶原酶消化法传代，并利用细胞形态观察、免疫荧光染色、核型分析、畸胎瘤 切片胚层分析方法对所建胚胎干细胞系进行鉴定。结果 序贯培