小麦矮腥黑穗菌差异片段筛选和分子检测体系的建立.pdfVIP

卷 期 ! ! 微 生 物 学 报 !（）： ! # ’ #% 年 月 日 #$$ % ! !#$ %’()(*(+$ ,-$ ! ()*)+, #$$ !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 小麦矮腥黑穗菌差异片段筛选与分子检测体系的建立 年四季，殷幼平，袁 青，夏玉先，王中康 （重庆大学生物工程学院，重庆大学基因工程研究中心，重庆市功能基因及调控技术重点实验室 重庆 !$$$.$ ） 摘 要：采取随机扩增 多态性（ ， ）引物介导的半特异 技术（ IJ( K7@LD; 7;M4N3L MD4O;DPMGC IJ( K(QI QRK K(QI MP;3P ;3L7,3L G3;1+M3CNC QRK， ），在从不同地域征集的 个小麦矮腥黑穗菌（ ， KS1QRK /% !##$% ’()%*(+$*, TUG@ ）菌株和 个小麦网腥黑穗病菌（ （ ） ， ）菌株的总基因组 中筛选鉴定出 独有的 2RT #9 !##$% ’*$, IR 2)4 2R2 IJ( 2RT 大小为 差异基因组片段。根据该片段序列设计筛选出 对特异性引物 和 /.##VM # RWX2RT#5 RWX2RT. RWX2RT!5 RWX2RT，均可以从 个 菌株的菌丝体和冬孢子 中稳定地扩增出 和 的单一靶带 ，而在 /% 2RT IJ( !VM #$$VM IJ( #9 个2R2 菌株的菌丝体或冬孢子IJ( 均无任何扩增产物。以腥黑穗菌属通用引物对RWXT-5 RWXT 为内置对照， 可以确定被检样品是否含QRK 抑制物质进而判断检测体系是否正确，同时有效地排除样品检测结果的假阳性和假 阴性。采用建立的2RT 特异QRK 检测技术体系，实现简单而快速地鉴定小麦矮腥黑穗菌冬孢子或罹病小麦组织中 侵染菌丝体的目的。 关键词： ； ；差异片段；内置对照 2RT 2R2 中图分类号： ； 文献标识码： 文章编号： （ ） W% W9. ( $$$/1-#$9 #$$ $!1$#1$! 由小麦矮腥黑穗菌（ ， ）引起 和 的基因组差异片段进行筛选。用筛选的差异片段设 !##$% ’()%*(+$*, TUG@ 2RT 2R2 的小麦矮腥黑穗病