台大医学院基因体医学中心基因转殖动物核心实验室.doc

台大醫學院基因體醫學中心基因轉殖動物核心實驗室 原核胚顯微注射(Pronuclei Microinjection)申請表 申請人需確實填寫此申請表格以便順利生產基因轉殖小鼠 日期： / / 20 實驗室主持人 單位 電子郵件信箱 研究計劃名稱 計劃經費來源 聯絡人 電話 傳真 聯絡人電子郵件信箱 構築基因名稱： 構築基因說明 構築基因性質： _________________________(reporter,over-expression …等) 轉殖基因來源 ( 請具體說明任何可能和疾病相關連的特性。.) 物種別： 表現性狀： 基因之功能： 疾病相關性： 無 有,相關疾病說明： 參考文獻： 使用之載體種類： 構築基因所使用之啟動子（promoter）： _______________ 質體(plasmid)尺寸: Kb 嵌入基因（insert）尺寸:___________ Kb 將用於顯微注射之構築基因(DNA construct)尺寸: ___________ Kb 預期表現性狀： 胚胎時期： 離乳時期 成熟期： 致死之可能性：____(有/無) 質體製備日期： / / 切下構築基因（顯微注射用）所使用的限制脢： 5’ 3’ 顯微注射濃度： ng/ul (一般使用 2ng/ul) 顯微注射使用小鼠品系: FVB B6 補充說明 含構築基因之詳細的質體設計圖 請註明啟動子、嵌入的基因、多重選殖點(multiple cloning sites)、抗生素種類、將用以顯微注射的片段。 (質體設計圖及膠片電泳圖請貼於此處) 注意： 基因轉殖實驗室將在文件確認無誤後儘快與你聯絡。 2. 膠片電泳圖之照片應： 在低電壓下（50 Volt）操作。 兩基因片段間完全分離。 EtBr/Gel Star 在操作膠片電泳後有完整染色。 膠片電泳圖應大，且具備以下資訊： 基因分子量標記。 指出膠片電泳圖上構築基因所在處。 用以操作電泳之DNA的量。 構築基因必須新鮮，且是在操作顯微注射前一週內製作。 構築基因不大於10kb，濃度不得少於1.5ug/ul， 總量需大於10ug。構築基因應包含promoter至polyA。 *構築基因記錄編號：# ______________ 顯微注射排程： / /200 ( * 由基因轉殖實驗室填寫。) Page 1 of 2 原核胚顯微注射 2004/7版