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持续性压力对VEGF分泌的影响 芮 泽，张喜善，张辉，范克伟，王德峰 (泰山医学院附属医院，山东泰安271000) 摘要[目的]探讨持续性压力促进成骨细胞分泌血管内皮生长因子(VEGF)的机制。[方法]取l ～2日龄sD大鼠颅盖骨进行成骨细胞原代培养，检测并鉴定成骨细胞。细胞培养至第3代，分为加压组 和不加压组，每组再分成PD98059不预处理组和预处理组。加压组在密闭容器内采用压缩空气施以100 kPa的静压力，分别加压O．5、2．0、6．O mRNA的变化；westem 力促进成骨细胞VEGF com }电子信箱：zxs2717@163 蚕丝人工韧带复合骨髓基质干细胞的实验研究 杨绪峰，刘庆鹏，韩增斌，贾庆卫，张辉 (泰山医学院附属医院骨科，泰安271000) 摘要【目的]利用自制的蚕丝人工韧带支架，多种方法对表面结构进行改性，观察对比不同分组间 种子细胞粘附、生长情况，为组织工程化人工韧带支架材料与种子细胞复合提供一种理想的方法。[方 法]蚕丝人工韧带支架材料，采用胰酶、碳酸钠联合脱胶，称重测韧带脱胶率，以EDC(1一乙基一3一 (3一二甲基氨丙基)碳化二亚胺)／NHS(N一羟基琥珀酰亚胺)作为交联剂进行胶原的交联，酶标仪法 测其交联度。采用荧光显微镜、扫描电镜观察蚕丝脱胶及与交联胶原复合后的表面结构变化。把韧带支 架分为试验组、参照组和空白对照组。参照组蚕丝人工韧带与胶原结合形成蚕丝一胶原结合韧带支架， 不做交联处理；试验组采用EDC／NHS对蚕丝一胶原结合韧带支架材料进行交联；空白组未作任何处理。 stem 兔的骨髓基质干细胞(Mamwmesenchymal 材料上，对三种材料表面培养的细胞进行了荧光显微镜、扫描电镜及酶标仪的检测。比较不同分组间细 胞粘附、增殖生长情况。[结果]采用胰酶、碳酸钠联合脱胶，能将丝胶基本去除，脱胶率29％左右。 当EDC浓度为39／L时，交联度最大。荧光显微镜下未脱胶蚕丝表面比较完整；脱胶蚕丝结构变得蓬松， 表面光滑，丝素纤维暴露。SEM观察，未脱胶蚕丝表面粗糙不平，丝胶包绕在丝素纤维周围；脱胶完全 的蚕丝表面很光滑，可见单根的丝素纤维。荧光倒置显微镜及SEM下复合胶原后的韧带可见，胶原呈一 薄层分布在韧带表面，呈不规则的线状突起，色泽较白。交联后胶原一蚕丝韧带成蜂窝状。全血贴壁法 左右；cD44+占42％左右，表现为干细胞特性。荧光显微镜下，未交联胶原一蚕丝韧带细胞数目较少， 细胞未见舒展；交联后的胶原一蚕丝人工韧带，蚕丝表面粗糙，细胞粘附率较高，舒展充分，蚕丝之间 的间隙模糊。sEM下见，交联后的蚕丝人工韧带与细胞贴合紧密，细胞伸展充分，有较多的触角伸出， 明显优于其它组。经单因素方差分析，试验组与参照组、空白对照组比较P0．05，差异有统计学意义。 ．218·