川牛膝多糖对鸡免疫器官组织学和超微结构影响的动态观察.pdfVIP

川牛膝多糖对鸡免疫器官组织学和超微结构 影响的动态观察 李金良1 袁定胜1 曾富强1詹素琼1李旭廷1 殷中琼2 (1．四Jll省畜牧科学研究院兽药研究所，四川成都610066； 2．四川农业大学动物医学院，四川雅安625014) 摘要 目的：探讨川牛膝多糖对鸡免疫器官的组织学和超微结构的影响。方法：出壳鸡饲喂基础日粮 至7日龄后，分别饲喂400mg／妇和800 重效果最好的组进行取材(脾脏、法氏囊、胸腺)，制作石蜡切片，苏木素伊红(H、E)染色，观察免疫器官的组 织学变化，另取脾脏制作电镜切片并观察其超微结构的变化。结果：光镜下，川牛膝多糖400mg／kg剂量组 与对照组相比，法氏囊各组织结构更加成熟，其粘膜平整，皮髓质分界相对早而清楚，皮质增厚，淋巴滤泡直 径增加；脾脏体积增大，红白髓分界明显，动脉鞘增厚，脾小体增大增多，生发中心明显；胸腺的皮髓质分化早 而明显，皮质增厚，胸腺小体数量增多，体积增大相对明显；各组织中淋巴细胞排列与对照组相比均更加致 密，与同日龄相比，淋巴细胞发育较成熟。电镜下，川牛膝多糖组脾脏中的淋巴细胞形态均一，核仁增多，核 染色质边移。结论：川牛膝多糖可促进法氏囊、脾脏和胸腺的早期发育。 关键词 川牛膝多糖；免疫器官；组织学；超微结构；鸡 活性多糖。它对动物的生长发育有明显的促进作用，并能促进细胞免疫和体液免疫，积极参与免疫应答的各 种生命活动，提高动物的免疫力，是一种较好的天然免疫调节剂。 目前的研究大多集中在怀牛膝多糖，而对川牛膝多糖的研究较少。在前期的研究中，我们已经详细地探 讨了川牛膝多糖对机体细胞免疫和体液免疫的影响。本试验着重观察川牛膝多糖对鸡免疫器官发育的影 响，并从组织学的角度深入研究该多糖提高鸡体免疫力的作用机理。旨在为川牛膝作为中草药免疫增强剂 及饲料添加剂的临床应用和推广提供理论依据，促进养殖业的健康快速发展。 1 材料 1．1 川牛膝多糖 本实验室自制。用从四川天全产道地药材——川牛膝，干燥粉碎，进行回流提取，并用经典的“水提醇 沉”处理后得到的精制川牛膝总多糖。 1．2 实验动物及分组 基金项目：四川省财政运行专项 作者简介：李金良(1963一)，男，研究员，四川眉山人，主要从事兽药研究与应用。 391 四川省畜牧兽医学会2014年学术年会 J 组20只，分笼饲养，I组(对照组)：饲喂基础日粮；Ⅱ组(川牛膝400mg／kg组)：基础日粮添加400m∥kg 牛膝多糖；Ⅲ组(川牛膝800n，g／kg组)：基础日粮添加800mg／kg川牛膝多糖。 表1基础日粮配方 1．3 主要试剂 4％多聚甲醛，各级浓度的酒精，二甲苯，甲苯石蜡，硬蜡，蛋白胶，苏木素，1％盐酸酒精，伊红，1％酸酒 精，中性树胶，等等。 2 方 法 2．1 样品采集与处理 试验中，选择增重效果较好的组进行采样检测。分别在7、14、21、28日龄取胸腺、脾脏、法氏囊，进行如 下处理。 2．2组织切片的制作 将采取的免疫器官固定于4％的多聚甲醛中，常规石蜡切片，HE染色，光镜下观察各免疫器官的组织学 变化，并测定法氏囊滤泡大小，Olympus显微照相。 2．3 超微切片的制作 将按电镜要求取材的免疫器官(28日龄脾脏)，用2．5％的戊二醛及四氧化锇双固定，超微切片，醋酸双 氧铀一醋酸铅双染色法染色，透射电镜对切片进行超微结构的观察及拍照。 2．4 数据处理 所有数据均以(笫±s)表示，采用sPSsl2．o统计软件进行方差分析。 3 结 果 3．1 免疫器官的组织学变化 3．1．1 法氏囊 7日龄时，对照组法氏囊皱襞较小，粘膜高低不平，厚薄不均，多为2—3层结构，含单层立方上皮、柱状 上皮和立方上皮细胞，大部分淋巴滤泡开始形成，也有部分尚未形成(见图1)；固有层为疏松结缔组织，由网 状纤维和网状细胞构成，部分淋巴小结雏形已形成，体积较小，内多为散在的淋巴样细胞，淋巴细胞排列疏松 且不成熟，胞核淡染，只在粘膜突起处聚集，皮、髓质分界不明显。