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实验一、微生物的培养与分离 【选修一实验考纲要求】： 1、探究酶在洗涤方面的作用……c 2、酵母细胞的固定化技术……b 3、腐乳的制作……………………a 4、果酒和果醋的制作…………b 5、微生物的分离与培养…………b 6、DNA的粗提取与鉴定……b 一、真题回顾： 【例1】（2013江苏, 18）某研究小组从有机废水中分离微生物用于废水处理。下列叙述正确的是A.培养基分装到培养皿后进行灭菌 B.转换划线角度后需灼烧接种环再进行划线 C.接种后的培养皿须放在光照培养箱中培养 D.培养过程中每隔一周观察一次 （1）实验用的培养皿常用的两种灭菌方法是 ；为了减少灭菌后器皿被污染，灭菌前应该 。 (2)为了筛选出酵母菌,培养基中添加了青霉素，其目的是 。 (3)右图是灭菌锅及其局部剖面示意图，图中甲、乙、丙指示的依次是 。(填序号) ①安全阀、放气阀、压力表 ②放气阀、安全阀、压力表 ③安全阀、放气阀、温度表 ④放气阀、安全阀、温度表 （4）为了将分离到的菌株纯化，挑取了菌落在3块相同平板上划线，结果其中一块平板的各划线区均未见菌生长，最可能的原因是 。 （5）为增加β-胡萝卜素提取量，在研磨酵母细胞时，添加石英砂的目的是 ；研磨时 (填“需要”或“不需要”)添加CaCO3，理由是 。 二、讨论思辩： 1．微生物培养基中主要包括哪些类别的营养要素？试举例说明。 2．培养基配制的操作流程通常是什么？试用文字与箭头加以概括。 3．对比分析“消毒”与“灭菌”的含义、常规方法。在实验操作中，有哪些具体做法可以避免杂菌污染？ 4．微生物接种的常用方法有哪些？若要进行微生物的分离，通常选用什么接种方法？若还需对分离的微生物进行计数，则应选用什么接种方法？所选用的培养基是哪一类型的（按状态及功能分）？ 5．试归纳分离可分解纤维素（或尿素）的微生物的操作思路。如何对分离结果进行分析、鉴定？ 三、典例研读 【例3】（新课标Ⅱ卷15分）为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌的分离等工作。回答下列问题： （1）该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空平板先行培养了一段时间，这样做的目的是 ；然后，将1mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每升水样中的活菌数为 。 （2）该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作时，接种环通过 灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线。这样做的目的是 。 （3）示意图A和B中， 表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。 （4）该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养。结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是：振荡培养能提高培养液的 的含量，同时可以使菌体与培养液充分接触，提高 的利用率。 植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解。回答下列问题: （1）分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶，该酶是由3种组分组成的复合酶，其中的葡萄糖苷酶可将 分解成 。 （2）在含纤维素的培养基中加入刚果红（CR）时，CR可与纤维素形成 色复合物。用含有CR的该种培养基培养纤维素分解菌时，培养基上会出现以该菌的菌落为中心的 。 （3）为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落，某同学设计了甲、乙两种培养基（成分见下表）： 酵母膏 无机盐 淀粉 纤维素粉 琼脂 CR溶液 水 培养基甲 + + + + - + + 培养基乙 + + + - + + + 注：“+”表示有，“－”表示无。 据表判断，培养基甲 （填“能”或“不能”）用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是 ；培养基乙 （填“能”或“不能”）用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是 。 【例5】 (2013四川卷)普通酵母菌直接利用淀粉的能力很弱，有人将