2015高中生物 5.3血红蛋白的提取和分离同步练习（含解析）新人教版选修1.docVIP

课时训练14　血红蛋白的提取和分离 1.下列关于凝胶色谱柱的操作,正确的是(　　)。 A.将橡皮塞上部用刀切出锅底状的凹穴 B.将橡皮塞下部用刀切出凹穴 C.插入的玻璃管的上部要超出橡皮塞的凹穴底面 D.将尼龙网剪成与橡皮塞下部一样大小的圆片 解析:制作凝胶色谱柱时,先选择合适的橡皮塞打孔,然后将橡皮塞上部用刀切出锅底状的凹穴,取适宜长度的玻璃管插入橡皮塞孔内,插入的玻璃管的上部不得超出橡皮塞的凹穴底面。将尼龙网剪成与橡皮塞上部一样大小的圆片,覆盖在橡皮塞的凹穴上,再用尼龙纱将橡皮塞上部包好,插入到玻璃管的一端。 答案:A 2.使用SDS—聚丙烯酰胺电泳的过程中,不同蛋白质的电泳迁移率完全取决于(　　)。 A.电荷的多少　　　　　　B.分子的大小 C.肽链的多少 D.分子形状的差异 解析:SDS能与各种蛋白质形成蛋白质SDS复合物,SDS所带的负电荷量大大超过蛋白质分子原有的电荷量,因而掩盖了不同蛋白质间的电荷差别,使电泳迁移率完全取决于分子的大小。 答案:B 3.在血红蛋白的整个提取过程中,不断用磷酸缓冲液处理的目的是(　　)。 A.防止血红蛋白被氧气氧化 B.血红蛋白是一种碱性物质,需磷酸中和 C.磷酸缓冲液会加速血红蛋白的提取过程 D.让血红蛋白处在稳定的pH范围内,维持其结构和性质 解析:磷酸缓冲液的作用是稳定pH,从而维持血红蛋白的结构和性质。 答案:D 4.蛋白质的提取和分离分为哪几步?(　　) A.样品处理、凝胶色谱操作、SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳 B.样品处理、凝胶色谱操作、纯化 C.样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定 D.样品处理、纯化、粗分离、纯度鉴定 解析:蛋白质的提取和分离分为样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定四步。A中凝胶色谱操作及SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳为实验操作过程中的技术。 答案:C 5.下列关于DNA的粗提取实验和血红蛋白的提取实验,叙述正确的是(　　)。 A.前者选择鸡血细胞作为实验材料较好,后者选择哺乳动物成熟的红细胞作为实验材料较好 B.样品预处理时,前者静置1天处理除去上清液;后者需要加入清水,反复低速短时间离心洗涤,至上清液无黄色 C.在DNA粗提取实验中,往2 mol/L氯化钠溶液中加入蒸馏水析出DNA时,应该缓慢加入,直到出现黏稠物即止 D.洗涤红细胞的目的是去除血浆中的葡萄糖、无机盐等 解析:鸡血细胞有细胞核,适于提取DNA;哺乳动物成熟红细胞无细胞核和众多细胞器,适用于提取血红蛋白。提取血红蛋白的实验中,洗涤红细胞时,不能加清水,应该加入生理盐水,否则细胞会提早释放出血红蛋白与杂质混合,加大提取难度。DNA初次析出时,加蒸馏水至黏稠物不再增加为止。洗涤红细胞的目的是去除杂质蛋白,以利于血红蛋白的分离和纯化。 答案:A 6.关于凝胶色谱柱的装填,除哪项外均为正确解释?(　　) A.交联葡聚糖凝胶(Sephadex G75)“G”表示凝胶的交联程度、膨胀程度及分离范围,75表示凝胶得水值 B.色谱柱内不能有气泡存在,一旦发现有气泡,必须重装 C.用300 mL物质的量浓度为20 mmol/L的磷酸缓冲液充分洗涤平衡凝胶12 h D.凝胶用自来水充分溶胀后,配成凝胶悬浮液 解析:本实验中使用的交联葡聚糖凝胶(Sephadex G75),其中G表示凝胶的交联程度、膨胀程度及分离范围,75表示凝胶得水值,即每克凝胶膨胀时吸水7.5 g;气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序,降低分离效果,因此,一旦发现有气泡,必须重装;在洗脱过程中,应在约50 cm高的操作压下,用300 mL物质的量浓度为20 mmol/L的磷酸缓冲液充分洗涤平衡凝胶12 h,以使凝胶装填紧密;凝胶溶胀时,应使用蒸馏水将其充分溶胀,制成凝胶悬浮液。 答案:D 7.下列各项中,一般不影响在凝胶色谱法分离蛋白质中的分离度的是(　　)。 A.层洗柱高 B.层洗柱的直径 C.缓冲溶液 D.样品的分布 解析:分离度取决于柱高,为分离不同组分,凝胶柱床必须有适宜的高度。样品的分布也影响分离度。缓冲溶液的pH影响蛋白质所带的电荷,因此也影响分离度。只有层洗柱的直径一般不影响分离度。 答案:B 8.已知某样品中存在甲、乙、丙、丁、戊五种蛋白质分子,其分子大小、电荷的性质和电荷量情况如下图所示,下列有关蛋白质分离的叙述正确的是(　　)。 A.若将样品以2 000 r·min-1的速度离心10 min,分子戊存在于沉淀中,则分子甲也存在于沉淀中 B.若用凝胶色谱柱分离样品中的蛋白质,则分子甲移动速度最快 C.将样品装入透析袋中透析12 h,若分子乙保留在袋内,则分子丙也保留在袋内 D.若用聚丙烯酰胺凝胶电泳分离样品中的蛋白质分子,则分子甲和分子丙形成的电泳带相距最远 解析:若用离心法分离蛋白质,则相对分子质量大的分子先沉淀下来,即丙在沉淀中。