2013高考生物复习课件 选修3第33讲 基因工程.pptVIP

若要在限制酶切割目的基因和质粒后使其直接进行连接，则应选择能使二者产生________(相同、不同)粘性末端的限制酶。 (2)利用大肠杆菌生产人胰岛素时，构建的表达载体含有人胰岛素基因及其启动子等，其中启动子的作用是____________________________。 在用表达载体转化大肠杆菌时，常用________处理大肠杆菌，以利于表达载体进入；为了检测胰岛素基因是否转录出了mRNA，可用标记的胰岛素基因片段作探针与mRNA杂交，该杂交技术称为________。为了检测胰岛素基因转录的mRNA是否翻译成________，常用抗原—抗体杂交技术。 (3)如果要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞，先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的________中，然后用该农杆菌感染植物细胞，通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的________ 上。 【解析】　(1)DNA分子经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：粘性末端和平末端。当限制酶在它识别序列的中心轴两侧将DNA切开时，产生的是粘性末端，而当限制酶在它识别序列的中心轴线切开时，产生的是平末端。 要使目的基因和质粒直接进行连接，应使用同种限制酶切割目的基因和质粒，使二者产生相同的粘性末端。 (2)一个基因表达载体的组成，除含有目的基因 外，还必须有启动子、终止子和标记基 因。启动子是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因首端，是RNA聚合酶识别和结合部位， 可以驱动目的基因转录出mRNA。在用表达载体转化大肠杆菌时，为便于表达载体进入，常用CaCl2处理大肠杆菌。要检测目的基因是否转录出对应的mRNA，可采用分子杂交技术，即用目的基因片段作探针，与mRNA杂交，如果显示出杂交带，则表明目的基因转录出了mRNA。 (3)运用农杆菌转化法将目的基因导入植物细胞时，要先将目的基因插入农杆菌Ti质粒的T-DNA中，然后使该农杆菌感染植物细胞，通过DNA重组将目的基因插入到植物细胞的染色体DNA上。 【答案】　(1)平　相同 (2)驱动胰岛素基因转录出mRNA　CaCl2溶液(或Ca2＋)　分子杂交技术　蛋白质 (3)T-DNA　染色体DNA 易混淆的几种酶 如图为DNA分子的某一片段，其中①②③分别表示某种酶的作用部位，则相应的酶依次是(　　) 易错警示 例1 A．DNA连接酶、限制酶、解旋酶 B．限制酶、解旋酶、DNA连接酶 C．解旋酶、限制酶、DNA连接酶 D．限制酶、DNA连接酶、解旋酶 【解析】　限制酶、DNA连接酶的作用部位为磷酸二酯键，解旋酶的作用部位在氢键。 【答案】　C 纠错笔记 五种酶的比较 项目 种类　 作用底物 作用部位 作用结果 限制酶 DNA分子 磷酸二酯键 形成粘性末端或平末端 DNA连接酶 DNA分子片段 磷酸二酯键 形成重组DNA分子 项目 种类　 作用底物 作用部位 作用结果 DNA聚合酶 脱氧核苷酸 磷酸二酯键 形成新的DNA分子 DNA(水解)酶 DNA分子 磷酸二酯键 形成脱氧核苷酸 DNA解旋酶 DNA分子 碱基对间的氢键 形成单链DNA分子 对“基因诊断”和“基因治疗”概念及应用辨析不清 下列关于基因工程应用的叙述，正确的是(　　) A．基因治疗就是把缺陷基因诱变成正常基因 B．基因诊断的基本原理是DNA分子杂交 C．一种基因探针能检测水体中的各种病毒 例2 D．利用基因工程生产乙肝疫苗时，目的基因存在于人体B淋巴细胞的DNA中 【解析】　基因治疗是用正常基因取代或修补病人细胞中有缺陷的基因，从而达到治疗疾病的目的；一种基因探针并不能检测水体中的各种病毒； 用基因工程生产乙肝疫苗时，其目的基因是乙肝病毒表面抗原基因，该基因存在于乙肝病毒中。 【答案】　B 纠错笔记 (1)基因诊断 基因诊断是用放射性同位素(如32P)、荧光分子等标记的DNA分子做探针，利用DNA分子杂交原理，鉴定被检测标本上的遗传信息，达到检测疾病的目的。 (2)基因治疗 把健康动物的正常基因导入含有缺陷基因的受体细胞中，存在基因缺陷的病人细胞中既含有缺陷基因，又含有通过基因工程导入的正常基因，在病人体内两种基因都能表达，正常基因的表达产物掩盖了缺陷基因的表达产物，从而治愈了基因缺陷引起的疾病。 2．形成重组DNA分子 一般采用同一种限制性核酸内切酶切割质粒和目的基因，以获得相同的粘性末 端，以利于形成重组DNA分子；但用不同的限制性核酸内切酶处理也可以获得相同的粘性末端；甚至用不同限制性核酸内切酶处理获得的不同粘性末端也可形成重组DNA分子。 3．将重组DNA分子导入受体细胞 (1)常用的受体细胞：大肠杆菌、枯草杆菌、酵母菌和动植物细胞等。 (2)导入方法 生物种类 植物细胞 动物细胞 微生物细胞 常用方法 农杆菌转化法 显