HCV阳性无偿献血者和急慢性丙肝患者单片段HCV抗体、HCV—RNA检测结果分析.pdfVIP

维普资讯 山东医药 2006年第 46卷第 25期 HCV 阳性无偿献血者与急慢性丙肝患者单片段 HCV 抗体、HCV—RNA检测结果分析 颜景欣 (济宁市中心血站，山东济宁272011) [摘要] 采用EIA法和 RT—PCR技术，对ALT正常、HCV阳性无偿献血者与急慢性丙肝感染患者进行单 片段 HCV抗体、HCV—RNA检测 。结果显示 ，C、NS3抗体出现较早 ，检 出率、反应性较强，对丙肝有诊断价值。慢 性丙肝NS4、NS5抗体检出率较高，RT—PCR检出率低于抗体检测，可发现早期感染者。抗一E1和抗一E2抗体阳性 率 明显低于其他抗体 ，提示膜 区具有保护性。 [关键词] 乙型肝炎；HCV抗体 ，单片段 ；HCV—RNA [中图分类号] R512．6 [文献标识码] B [文章编号] 1002-266X(2006)25—0061—02 为了解丙肝病毒 (HCV)感染患者各功能区抗体 方法确证 。 检 出情况 ，提高血液 HCV检出率 ，避免发生输血后 1．2．2 HCV—RNA检测 引物根据 HCV基因 5末 丙肝。2000~2005年 ，我们对 ALT正常、HCV阳性 端设计 。RNA提取采用冷酚法 ，用此试剂检测 国家 无偿献血者 (下称献血者)与急慢性丙肝患者进行单 HCV—RNA 参照血清，结果完全一致证 明本文方法 片段 HCV抗体、HCV—RNA检测 。现报告如下。 可靠。 1 材料与方法 2 结果 1．1 标本来源 本文血清标本来源于济宁市中心 2．1 不同l临床型 HCV感染各功能区抗体 阳性率及 血站及济宁部分医院，其 中献血者 36例 (A组)，急 S／0D值 见表 1。 性 丙肝患者 61例 (B组)，慢性丙肝患者 57例 (C 2．2 不同临床型 HCV感染 C(C11)、NS3(C7)抗体 组)。三组血清均经上海科华抗一HCV—EIA试剂盒或 检测结果 见表 2。 HCV—RNA检测阳性，并排除 甲肝病毒、乙肝病毒、 2．3 RT—PCR与单片段 HCV抗体、抗一HCV检测 EB病毒感染。 结果 见表 3。 1．2 方法 采用美 国Abbott公司第三代抗 HCV— 2．4 不同临床型HCV感染 RT—PCR阳性标本 中各 EIA试剂 ，该试剂抗原包括核心区蛋 白C22和非结 抗体阳性结果 见表 4。 构区蛋白C2OO(NS3区C33C，NS4区C1OO一3)。操作 表 1 不 同临床型 HCV感染各功能区抗体 阳性率及 S／OD值 及临界值计算按说明书。 1．2．1 HCV抗原单片段建立及检测 核心区抗原 C11、非结构区抗原 NS3(C7)，NS4重组抗原及 C5— 1—1合成肽、NS5，膜 区E1、E2抗原为大肠杆菌表达 的重组抗原 。制备单片段抗 HCV—EIA试剂，以及C、 NS3、NS4、NS5抗原为主要成分 的抗 HCV—EIA试 剂 ，用此试剂检测抗 HCV—EIA第一、二代 国家血清 参照品，并与相关的RIBA(国外用于HCV的确认试 表 2 不 同临床型 HGV感染C(Cl1)、NS3(C7)抗体 剂)结果对 比。所有单片段试剂 阴性、阳性结果与 RIBA检测相符 ，表示各单片段EIA试剂成立。未知 标本检测每板用 4O份阴性标本做对照，随反应板一 起完成测定。阴性对照选 自国家第二代抗HCV—EIA 试剂标准血清 N1一N24、N72一N88。计算对照吸光度 (OD)值。临界值以 ±4s计算 (小于0．2以0．2计)， 大于或等于临界值为 阳性 ，阳性样品均用 中和阻断 61 维普资讯 山东医药