第五讲 病毒.ppt

照片中的蓝色部分就是H5N1禽流感病毒，下面的红色部分则是健康人体细胞，照片显示H5N1禽流感病毒正在攻击健康的细胞。 1898年，M.W.Beijerinck研究了烟草花叶病病原体，首次提出其病原是一种“传染性的活性液体”或称“病毒”。 从此,许多学者陆续发现了各种植物病毒、动物病毒和细菌病毒——噬菌体。 1935年，W M Stanley首次提纯并结晶了烟草花叶病毒；Bawden等证明烟草花叶病毒的本质为核蛋白。 1940年，Kausche首先用电镜观察到烟草花叶病毒颗粒。 狂犬病——最早记载的动物病毒病 1884年 法国巴斯德Pasteur首次研制狂犬病疫苗 二、病毒的基本特征 1、非细胞结构，基本化学组分是蛋白质和核酸，只含一种类型的核酸，DNA或者RNA。 2、个体极其微小，在电镜下可见。其大小用纳米表示。 3、专性活细胞内寄生，只能在特定的活寄主细胞中生活。 4、对一般抗生素不敏感。 病毒的大小与形态 病毒大小的测量单位是纳米（nm）。 病毒的基本形态为球状（腺病毒）、杆状（TMV)、蝌蚪状（T偶数噬菌体）。也有子弹状、丝状、砖状等形态。 此外，还有包涵体（inclusion body）。 弹状病毒 卵圆形病毒 蝌蚪状病毒 杆状病毒 砖型病毒 丝状病毒 球状病毒 乙肝病毒的三种颗粒 乙肝病毒 七、理化因子对病毒的作用 物理因子和化学因子 保护作用：有益于病毒的生存 诱变作用：造成病毒某些生物学特性的改变 灭活作用：使病毒活性丧失 1、物理因子 （1）温度( “喜冷怕热”) 作用机制：使病毒蛋白质，特别是病毒的表面蛋白质变性。 核酸对热的抵抗力较强。 影响因素：蛋白质、钙、镁、蛋白酶、核酸酶 温度的剧烈变化，尤其是反复冻融常可使许多病毒很快灭活。 （2）电离辐射 机制：电离辐射中的X射线和γ射线作用于其它物质后产生次级电子，次级电子再通过直接和间接作用，作用于病毒核酸（DNA或RNA）而使病毒失活。 单链病毒对电离辐射的灭活作用比双链病毒敏感约10倍。 （3）紫外线（主要作用于核酸） 机制： 使嘧啶碱基之间形成二聚体 DNA：TT、CT、CC RNA：UU 核酸链断裂 分子内或分子间交联 核酸和蛋白质之间的交联 核酸不能复制和转录，从而导致病毒的灭活，但病毒蛋白质的免疫原性仍保持。 2、化学因子 酶类 核酸酶 破坏核酸 磷脂酶 破坏囊膜磷脂 蛋白酶：胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶等 pH 大多数病毒 pH 6-8 稳定 pH5.0 or 9.0 迅速灭活 脂溶剂 乙醚、氯仿、丙酮：灭活有囊膜病毒 氟里昂、正丁烷：抽提脂质和蛋白质，常用于病毒提纯 机制：与腺嘌呤、鸟嘌呤和胞嘧啶或蛋白质的胺基作用。 病毒的核酸和蛋白质都有破坏作用，但首先是作用于病毒的核酸 用于灭活病毒生产疫苗的甲醛浓度：0.05-0.2% 机制：烷化剂上的活性烷基使蛋白质分子上游离的-COOH、-NH2、-SH、-OH和核酸分子中的N发生烷基化作用，使病毒的蛋白质和核酸结构改变，功能丧失，从而被灭活。 种类：环氧乙烷、环氧丙烷、溴化甲烷、β—丙内酯、乙酰乙烯亚胺等 病毒学中的应用：气体消毒剂 灭活病毒，制备疫苗 石炭酸 阳离子去污剂：SDS、去氧胆酸钠 非离子去污剂：吐温-20、吐温-80、NP-40 石炭酸 剥离病毒粒子的蛋白质衣壳 吐温和去氧胆酸钠 破坏病毒的囊膜，但可保存病毒粒子原来的蛋白结构和抗原性。 SDS 剥离病毒粒子的蛋白质衣壳 使蛋白质降解为多肽 溶解病毒囊膜 NP-40 裂解病毒蛋白质 能够减轻病毒保存过程中其他理化学因子对病毒的损伤，从而保持病毒的感染性、抗原性等生物活性的物质。 甘油： 在50%的甘油盐水，病毒可存活达几十天、几个月至几年（牛瘟病毒例外）。 二甲基亚砜DMSO：减少冷冻过程中微小冰晶的形成 ?首先，噬菌体以其核酸中的遗传信息向宿主细胞发出指令并提供“蓝图”，使宿主细胞的代谢系统按严密程序、有条不紊的逐一转向或适度改造（酶），从而转变成能有效合成噬菌体所特有的组分和“部件”，其中所需的“原料”可通过宿主细胞原有核酸等的降解、代谢库内的贮存物或从外界环境中取得。 ?一旦大批成套的“部件”已合成，就在细胞“工厂”里进行突击装配，于是就产生了一大群形态、大小完全相同的子代噬菌体。 昆虫病毒类型： ①核型多角体病毒NPV（nuclear polyhedronsis virus）： 在昆虫细胞核内增殖，具有蛋白质包涵体的双链DNA杆状病毒。经口感染后侵入细胞核，在核内增殖并形成多角体，每个多角体含许多病毒束，每