紫外分光光度法实验报告.docVIP

紫外分光光度法测定苯酚的含量 学生姓名 学号 专业 年级、班级 课程名称 实验项目 实验类型□验证□设计□综合 实验时间 年 月 日 实验指导老师 实验评分 【实验目的】 掌握紫外光谱法进行物质定性、定量分析的基本原理。 学习UV8500型紫外—可见分光光度计的使用方法。 【实验原理】 含有苯环和共轭双键的有机化合物在紫外区有特征吸收。物质结构不同对紫外及可见光的吸收曲线不同。最大吸收波长λmax、摩尔吸收系数εmax及吸收曲线的形状不同是进行物质定性分析的依据。本实验通过比较最大吸收波长和最大吸收波长与其所对应的吸光度的比值的一致性来鉴定化合物，我们从文献上查得苯酚的紫外吸收光谱数据，如下表： 物质 λmax/nm εmax/[L/(mol*cm)] εmax,λ1/ εmax, λ2 溶剂 苯酚 210 6200 4．3 水 270 1450 在紫外分光光度计上作苯酚水溶液的吸收光谱曲线，再由曲线上长出λmax，并计算出λmax与其对应的吸光度的比值，与表上所列数据进行对照，比较λmax及吸光度比值是否一致。 用紫外分光光度计进行定量分析时，若被分析物质浓度太低或太高，可使透光率的读数扩展10倍或者缩小10倍，有利于低浓度或高浓度的分析，其方法原理是依据朗伯-比耳定律：A=εb c。 【仪器与试剂】 （1）仪器 UV8500型紫外-可见分光光度计（或UV-PROBE紫外-可见分光光度计）；1cm石英吸收池2个；25mL比色管10支；10mL、5mL、1mL移液管各1支；100mL、250mL烧杯各1个；吸耳球2人个。 （2）试剂 约3×10-3mol/L苯酚水溶液。 苯酚标准溶液 吸取1g/L苯酚10mL于100mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，即为100mg/L。 【实验内容与步骤】 （1）定量分析 标准曲线的制作 取5支25mL的比色管，分别加入1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL、5.0mL苯酚（100mg/L），用去离子水稀释到刻度，摇匀。用1cm石英比色皿，去离子水作参比，在选定的最大波长下，分别测定各溶液的吸光度，以吸光度对浓度作图，作出工作曲线。 定量指定溶液中苯酚的含量 准确移取未知液10mL于25mL比色管中，用去离子水稀释到刻度，摇匀。在同样条件下测定其吸光度，根据吸光度在工作曲线上查出苯酚待测液浓度，并计算出未知液中苯酚含量。 【数据记录及结果分析】 由图可得知 苯酚标准溶液和待测样品吸光度的测定结果 苯酚的量(mg/L) 4.000 8.000 12.000 16.000 20.000 未知 吸光度 0.207 0.399 0.589 0.759 0.945 0.493 R2=0.99960 代入公式y = 0.04588x + 0.02931可得 X=10.10658238884 mg/L 【思考题】