Ad_VEGFP_CD_TK系统抑制乳腺癌细胞增殖的体内外实验研究.pdfVIP

广东医学 　2008年 1月 第 29卷第 1期 　 Guangdong M ed ica l Journa l　Jan. 2008, Vol. 29, No. 1 ·27 · Ad - VEGFP - CD / TK系统抑制乳腺癌细胞增殖的 体内外实验研究 △ 孔恒 　黄宗海 　李强 　俞金龙 　厉周 　范应方 ( ) 南方医科大学珠江医院普外科 广州 510282 ( ) 　　【摘要 】　目的　探讨腺病毒介导 V EGF启动子驱动的 CD / TK双 自杀基因体系 A d - V EGFP - CD / TK 对乳 腺癌细胞 MCF - 7 的体内外靶向杀伤作用 。方法 　用重组腺病毒 A d - V EGFP - CD / TK体外感染表达 V EGF 的 MCF - 7细胞和不表达 V EGF 的原代培养的乳腺上皮细胞 ,荧光显微镜观察其感染率 ,然后给予前药 GCV 和 5 - FC,用 M TT法观察该体系对细胞生长增殖的影响及其旁观者效应 ;用流式细胞术观察细胞周期及细胞内 DNA 含 量的变化 。建立 MCF - 7裸鼠皮下移植瘤模型 ,瘤内注射 A d - V EGFP - CD / TK,腹腔注射前药 14 d,观察肿瘤生 长抑制效应 。结果 　腺病毒对两种细胞的感染率相似 。M TT法检测显示 MCF - 7 细胞对前药具有较高的敏感 性 ,而乳腺上皮细胞对前药不敏感 ,且观察到该体系对 MCF - 7细胞明显的旁观者效应 。在感染复数为 100 时 ,用 流式细胞仪测定用药组出现典型的凋亡峰 ;细胞周期分析显示治疗后细胞 G - G 期比率增多 , G - M 及 S期细 0 1 2 胞减少 。在 MCF - 7裸鼠移植瘤模型中,该双自杀基因系统能够显著抑制肿瘤的生长 。结论 　V EGF启动子可调控 双自杀基因体系选择性杀伤人乳腺癌细胞 MCF - 7并诱导细胞凋亡 ,并可显著抑制人乳腺癌裸鼠移植瘤的生长 。 【关键词 】　自杀基因治疗 　腺病毒 　V EGF启动子 　乳腺癌 VEGF - m ed ia ted double su ic ide gen e selectively k ills brea st cancer cellsM CF - 7 　KON G H eng, HUAN G Z ong - ha i, L I Q iang, et a l. D ep a rtm en t of Genera l S u rg ery, Z huj iang H osp ita l, S ou thern M ed ica l Un ivers ity, Guangzhou 510282, Ch ina 　　【A b stract】　O bjective　To study the selective k illing effect of adenoviru (A d s) - m ediated doub le su icide gene (CD / TK) under the regu lation of the hum an vascu lar endothelial grow th factor (V EGF) p romoter on b rea st cancer cells MCF - 7. M ethod s　The V EGF - exp re ssingMCF - 7 cells and non V EGF - exp re ssing norm al hum an m amm ary ep itheli al cells in p rim ary cu ltu re