东亚三角涡虫胰蛋白酶Djtry的表达和酶活分析.pdfVIP

HEREDITAS (Beijing) 2012 5 , 34(5): 609―614 ISSN 0253-9772 研究报告 DOI: 10.3724/SP.J.1005.2012.00609 东亚三角涡虫胰蛋白酶Djtry 的表达和酶活分析 周鲁明, 刘殿辰, 孙欢欢, 赵博生 , 255049 通过对东亚三角涡虫胰蛋白酶 Djtry 氨基酸序列比对分析, 发现保守的催化三联体结构中第一位的 His 被 Lys 所取代。为了探究这种突变是否会对胰蛋白酶的活性有影响, 文章构建了原核表达重组质粒 pET-28a- Djtry, 转化到 E.coli BL21 中, 利用 IPTG 诱导表达, 对表达的重组蛋白进行变性、复性、纯化以及 Western blotting 鉴定, 获得成分均一的活性蛋白。利用牛胰蛋白酶为标准品,