略论紫外--可见分光光度计的可靠性.pdfVIP

第2期 光谱仅嚣与分析 31 略论紫外——可见分光光度计的可靠性 李昌厚 中国科学院上海生物—[程研究中心(上海200233) 摘要l本文从杂散光(stray1ight—s．L)…、…、噪声(Noise—N)‘“、化学、电子学等 几个主要方面概述了影响紫外可见分光光度计(Uv—Ⅵss)可靠性的主要因素；同时从元器件 的研制、测试方法的研究等几方面，讨论了保证Uv—VIsS-可靠性的有关问题。 0．前育 ． 可靠性是Uv—VIss最重要、最根本、最关键的性能指标；U1『一VIsS是集光、机、电、计 算机为一体的技术密集的高技术产品，其技术含量高、制造难度大、影响可靠性的因素多， 因此，必须注重对Uv-vISS可靠性的研究。本文将重点讨论影响Uv—VISS可靠性的主要因素： 同时，讨论如何保证Uv吖Iss仪器的可靠性。可供Uv—vIss的研究、生产、使用者参考。 1．111『吖I豁可靠性的内函 Uv—vIsS可靠性的好坏，是指比耳定律的偏离程度。uv—vIss的可靠性指标，主要包括 论值或实际值)之差。不管是制造者还是使用者，都希望自己研制或使用的Uv—VIss有很高 的PA和很小的D．。也就是希望仪器稳定可靠。任何一台Uv_vISS，如果测出的PA不准。就 谈不上可靠。如果D很太，同样也谈不上可靠。任何一台uv—vISS，都有其功能指标和性能 指标，如某Uv—vISS．它的功能齐全，人机对话程度很高，但性能指标较差，用它测出的数 据，’因人而异、因时而异，根本无法重复；而另一台uv—v1SS．它的智能化程度一般、功能 指标也一般，但其性能指标很好．使用时不受操作者和时间的影响：哪台仪器好呢?答案肯 定是后者好。所以稳定可靠应是用户挑选和评价Uv—vIss的唯一宗旨。 2．影响UV_vI豁可靠性的主要因素 2．1PA是U、，一VISS可靠性最核心的内容 影响PA的因素很多，最主要的有SL、N和光谱带宽度(SBw)”1：s．L¨对PA的影响， 随被测试样浓度的增大丽增加，当试样浓度增大到一定程度时，由于S．L的影响及试样中 吸收粒子间距缩小，相互作用加剧甚至发生缔合作用测试结果将严重偏离比耳定律，sharpe川 5％的测量误差。作者的研究证明：若某仪器的s．L¨为O．5％，则它对吸光度为1_5Abs的试 样测试，可，o生4．1％的误差!若要对吸光度为1-5Abs的试样分析，又要求误差为1．o％，则 仪器的S．L要求为0．1％。我国北京通用公司的TU一122lu．v—vIss，其S．L优于0．05％．它 32 光谱仅嚣与分析 对Abs为1．5的试样测试时，误差可小到O．44％!由此可见，s．L将限制uV—VIss的分析测 试浓度的上限，使高浓度的试样分析，产生很大的误差。 N在被测试样很稀时，N将成为分析测试工作的主要误差来源f2】，它限制U＼，一VIss的分 析测试浓度的下限n0】。笔者的研究表明．当用N=0．005的仪器分析测试Abs为0．2的试样 时，产生2．5％的误差。接我国药典规定，对人用药的测试误差应小于1．0％，如对Abs。0．08 的试样进行分析测试．则仪器的N必须小于0．000队!这是国内外绝大多数U、『一VISS无法达 500等仪器可满足此要求。 S聃也将严重影响PA，尤其在试样吸收峰很尖锐时，往往会使测量结果偏低，从而偏离 比耳定律。 2．2化学因素是影响可靠性的重要因素之一 从理论上讲，比耳定律只能适用于均匀、深度很低因而相对独立的、无相互作用可以忽 略不计的吸收粒子体系，但在实际工作中并非如此。试样在测定过程中，经常会发生缔合、 离解、电离、溶剂作用和产生同分异构体，组成新的络合物等化学变化，从而使吸收粒子相 互间的平均距离发生变化。以影响比耳定律的准确性，即产生比耳定律的偏离。例如：碘溶 液在可见光区会随所用的试剂不同而呈不同颜色；在四氯化碳中呈深紫色，‘而在乙醇中呈棕 色。酚在无极性的戊烷中有极尖锐的吸收带，而在极性很强的乙醇中，则没有尖锐的吸收带 等等，这些都说明化学因素会影响分析测试的可靠性。 2．3．IIv_vISS的电光系统的稳定性，是影响Uv—VISS整机可靠性的主要因素之一： 如果_台【J、，一VISS的稳定性差，也就谈不上可靠了。据美国■ins