替莫唑胺对脑胶质瘤细胞抗肿瘤作用的机制涉和活性氧介导的沉默信息调节因子1途径.pdfVIP

734· ．基础研究． 替莫唑胺对脑胶质瘤细胞抗肿瘤作用的机制 涉及活性氧介导的沉默信息调节因子1途径 蒋媛孙岩袁渊 【摘要】 目的 探讨替莫唑胺(TMZ)对恶性星形胶质瘤细胞株抗肿瘤作用的新分子机制。 方法以TMZ作用于人源性Ⅳ级星形胶质细胞瘤细胞株SHG44和U251，应用四甲基偶氮唑蓝 (MTI?)法检测细胞增殖，Hoechst33342染色法检测细胞凋亡，流式细胞术检测细胞周期，2’，7’一二氯 氢化荧光素二脂(DCFH—DA)探针检测细胞内活性氧(ROS)的水平，real—timePCR和Westernblot检 50 测细胞中沉默信息调节因子1(SIRTl)的表达。结果 ixmol／L及以上浓度TMZ作用SHG44和 U251细胞72 h后，与各自的对照组比较，可显著抑制细胞增殖(均P0．05)，并呈浓度依赖性。100 斗mol／LTMZ处理细胞72h后，SHG44、U251细胞的凋亡率显著增高，分别为(33．4±1．8)％和(26．8± 3．2)％；细胞周期阻滞在G：／M期，G2／M期细胞分别占66．16％和69．65％；ROS与DCFH．DA探针作 用发出的绿色荧光显著增强(P0．05)；SIRTlmRNA和蛋白的表达上调。结论TMZ对脑胶质瘤抗 肿瘤作用的机制可能涉及ROS介导的SIRTl途径。 【主题词】替莫唑胺；神经胶质瘤；沉默信息调节因子1；活性氧；细胞增殖；细胞凋亡 Mechanismoftemozolomide．．inducedanti．．tumoreffectson ceHsinvitroisviaROS．． glioblastoma SIRTl JIANG and dependentsignaHngpathway Yuan’，SUNlean。YUAN ofHead Yuan．’Department Neck andResearch Surgery，JiangsuCancerHo甲ital Institute，Na够ng210009，China Correspondingauthor：l，MNYuan，Email：yuanyuan810122@126．com To thenewmechanismof anti—tumor 【Abstract]Objectiveinvestigate temozolonfide(‘I忱)induced effectson ceilsinvitro．MethodsGradeIV celllinesSHG44andU25lceilsweretreated glioblastoma glioma with TMZ．MTItestwasusedtodeterminethe ofdiomacells．Hoechst33342 wasused proliferation assay tOdetect inthe cell flOW levelof tumorcells．The wasassessed apoptosis cycleprogression by cytometry．The intracellularreactive detectedDCFH．DA PCR and oxygenspecies(ROS)wasusing probe．real—timeassay Western wereused