PI3K信号通路对胃癌细胞P27磷酸化蛋白分布表达影响.pdfVIP

2012年第39卷第 14期 中国肿瘤 临床 945 基础研究 · PI3K信号通路对 胃癌细胞P27磷酸化蛋白分布 表达的影响 刘 勇① 韩 涛② 潘 源① 梁 寒① 摘要 目的：研究PI3K信号通路对 胃癌BGC一823细胞 中P27与磷酸化P27(p-P27)蛋 白表达分布的影响。方法：LY294002 处理BGC一823细胞，流式细胞术测定处理前后两组细胞周期分布。Westernblotting测定两组细胞总蛋 白、胞浆蛋 白、核蛋 白中 P27与D—P27(Thr187、Thr157及Serl0)蛋白含量及分布特点。结果 ：处理后G期细胞数明显增加 (83．9％vs．67．6％，PO．01)。P27 在总蛋白、胞浆蛋白和核蛋 白中表达均显著增加 (PO．01，PO．O1，P0．叭)；p-P27(SerlO)在总蛋白、胞浆蛋白和核蛋白中表达均 显著下降(P0．01，P0．01，P0．01)；p—P27(Thr157)在总蛋白、胞浆蛋白中表达均显著下降(尸0．01，P0．01)，在核蛋白中下降不明显 (P=0．482)；p-P27(Tbr187)在总蛋白、胞浆蛋白中表达均下降，在核蛋白中表达增高，均无显著性差异(P=0．254，P=0．70，P=0．223)。 结论 ：阻断PI3K通路可增加 胃癌细胞P27蛋白表达，降低p-P27蛋白表达，改变P27和p-P27蛋白的核浆分布，可以使细胞周期停 滞于G。期，诱导细胞凋亡。 关键词 PI3K信号通路 胃癌 P27蛋白 磷酸化P27蛋白 doi：10．3969~．issn．1000—8179．2012．14．002 EffectsOfPI3K SignalPathwayon theDistributionandExpressionOfPhOsphOrylatedP27 in GastricCancerCells YongLIU ，TaoHAN ，YuanPAN ，HanLIANG Correspondenceto：HanLIANG；Email：tjlianghan@126．tom DepartmentofGastricCancer,TianjinCancerInstituteandHospital，Tianjin300060，China DepartmentofUnitofIntensiveCare，TianjinCancerInstituteandHospital，Tianjin300060，China Abstract Objective：ToinvestigatetheeffectsofPI3KpathwayinhibitionontheexpressionanddistributionofP27andphos— phorylatedP27(p-P27)intheBGC一823gastriccancercellline．Methods：ThecelllineBGC一823wascultivatedandrteatedwith LY294002，aPI3K pathwayinhibitor．Thecellcyclewasdeterminedusingflow cytometry．Thetotalcell，cytoplasmic，andnuclearex— pressionofP27，p-P27(Thrl87)，p-P27(Thr157)，andp-P27(Serl0)wereanalyzedbyWesternblotanalysis．Results：Inhibitionof thePI3KpathwayarrestedcellcycleprogressionintheG1phase(treatedcellsvs．controlcellswas83．9％vs．67．6％，P0．01)．The totalcell，cytoplasmic，andnuclearexpressionofP27wassignificantlyincreasedinthetreatedgroupcomparedwiththoseinthecon— trolgroup(P0．Ol，