苯和甲醛联合染毒对小鼠脾脏组织损伤的研究.pdfVIP

2 引言 （Introduction ） 随着我国人民群众物质生活水平的提高，室内装修装饰、大量电气产品、空调的普及，多种日用化学 品的使用，致使室内产生大量的物理、化学、生物以及放射性污染因素，造成室内空气质量的严重下降。 由于室内装修材料中含有甲醛和苯系物较多,苯和甲醛成为室内空气的主要污染物，二者都是易挥发性有机 化合物，当空气中苯和甲醛的含量超过一定浓度时，短时间内人们就会感到头痛、恶心、呕吐、四肢乏力。 长期吸入可伤害人的肝脏、肾脏、大脑和神经系统，甚至会导致人体血液出现问题，患上白血病等其他严 重的疾病。 在诸多的室内污染物中, 甲醛以其来源广、毒性大污染水平高、污染时间长等特点,成为我国最重要的 室内空气污染物之一, 甲醛被世界卫生组织确定为可疑致癌物质，它主要危害于人体的上呼吸道和肺部。微 量摄入，可引起鼻、咽、喉部不适和烧灼感，长期过量吸人甲醛可引发鼻咽癌、喉头癌等多种严重疾病， [1] 对人体健康构成严重威胁 。苯对人体也有很大危害，苯主要经呼吸道进入人体，长期吸入苯浓度超标的 空气易引起苯的慢性中毒，引发喉头水肿及血小板下降等症状，严重的可导致血液系统恶性疾病的发生。 长期小剂量接触，可致蓄积毒性，毒作用主要是其酚类、醌类代谢产物对骨髓产生渐进性与不可逆性损害 [2] 。1982年国际癌症研究中心 （international agency for research on cancer ，IARC ）确认苯是对人类有致癌 [3] [4] 作用的化学致癌剂 ，流行病学资料显示苯的职业暴露可导致苯白血病的发生 。近年来，我国白血病发 病率呈日益上升趋势，高度怀疑日常生活苯暴露的增加是其中的重要原因之一。尤其是近年来我国装修的 普及使得非职业苯暴露与白血病的关系日益受到关注，有研究报道，装修后3个月内入住者，可能增加患 [5] 白血病的危险性 。因此，苯和甲醛不仅毒性大，而且对人体可能存在联合毒性作用。 脾脏是机体中最大的淋巴器官，参与体液免疫及细胞免疫，其主要的免疫学功能是通过截留血液里的 微生物，并与之产生免疫应答来过滤血液。它也除去损伤的红血细胞和免疫复合物。那些脾被去除的个体 对有荚膜的细菌感染有更大的易感性，并处于增加严重疟疾感染的危险中，这表明脾在免疫中的极大的重 要性。因此本实验选择脾脏作为主要的实验器官。目前，对甲醛和苯的单独作用研究较多，对二者的联合 毒性作用及机制报道较少，对其脾脏损伤的研究更少。 本实验以BALB/c小鼠为实验动物，分别以灌胃和气态吸入的方式对小鼠进行苯染毒和甲醛染毒，并在 显微镜下观察脾脏切片免疫组织形态变化，测定小鼠脾脏的脏器系数以及脾脏组织中活性氧 （reactive oxygen species,ROS ）和丙二醛 （malonaldehyde,MDA ）的含量，旨在探究苯和甲醛联合染毒对小鼠脾脏的 损伤作用及其对脾脏的损伤作用是否具有一定的相加作用，进而为预防室内环境污染对人体健康的危害提 供理论依据。 2 材料和方法 （Materials and Methods ） 2.1 实验动物与试剂以及仪器 BALB/c小鼠，雄性，体重22g 左右，购自湖北省预防医学科学院动物实验中心.10% 甲醛溶液 （Sigma 551 公司），4%多聚甲醛，DCFH-DA荧光染料 （˃99.9%，Sigma 公司），硫代巴比妥酸 （TBA，分析纯，国 药集团化学试剂有限公司），三羟基氨基甲烷盐酸盐 （分析纯，Amresco 分装），5,5，-二硫代二硝基苯 甲酸 （DTNB,分析纯，国药集团化学试剂有限公司）。5415R低温冷冻离心机 （德国 Eppendorf 公司）， MTN-21 血细胞分析仪 （Matenu医疗器械有限公司,长春），DNM-9602酶标分析仪，FLx 800 荧光酶标仪 （美国 Bio-Tek 仪器有限公司），Nikon eclipse 80i 荧光相差暗场显微镜 (Nikon corporation, Japan) ， HH-42 三用电热恒温水箱 （长源实验仪器厂，宁波）；WH-2 小型智能环境气候舱 （武汉市宇信科技开发 有限公司）；4160-2