检验医学专业实验III 临床血液学检验部分(另补充部分名解).docVIP

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检验医学专业实验III 临床血液学检验部分(另补充部分名解).doc

观察过的正常骨髓细胞系统:红细胞系统、粒细胞系统、巨核细胞系统、单核/淋巴/浆细胞系统,以及一些少见细胞 观察过的非正常骨髓涂片:巨幼细胞贫血(MgA)、增生性贫血(包括缺铁性贫血IDA)、再生障碍性贫血(AA);急性/慢性髓系白血病(AML/CML)、急性/慢性淋巴细胞白血病(ALL/CLL);骨髓增生异常综合征(MDS)、多发性骨髓瘤(MM)、特发性血小板减少性紫癜(ITP)。 以上内容结合理论课一并复习,注重其血象和骨髓象(尤其是特征性细胞),不特别整理。 ? 细胞化学染色:是以细胞形态学为基础,根据化学反应的原理,应用骨髓涂片进行固定、化学反应显色、复染等程序染色,然后在光学显微镜下观察细胞的化学成分及其变化的一项检验方法。 【作用】 研究血细胞在生理或病理情况下细胞化学成分的变化,有助于了解各种血细胞的化学组成及病理生理改变,可用作血细胞类型的鉴别,以及对某些血液病的诊断和鉴别诊断、疗效观察、发病机制探讨等均有一定价值。 一、过氧化物酶(POX)染色 【原理】 POX能分解试剂中的底物H2O2,释放新生态氧,使无色联苯胺氧化为蓝色联苯胺,后者与亚硝基铁氰化钠结合形成蓝黑色的颗粒,沉着于细胞质中。 二氨基联苯胺法的原理为:血细胞内的POX,能分解H2O2而释放出新生氧,后者氧化二氨基联苯胺,形成金黄色不溶性沉淀,定位于POX酶所在的活性部位。 正常血细胞的染色反应 粒细胞系统:分化差的原始粒细胞为阴性,分化好的原始粒细胞至中性成熟粒细胞均呈阳性;且随着细胞的成熟,阳性反应的程度逐渐增强。嗜酸性粒细胞阳性最强,嗜碱性粒细胞阴性。 单核细胞系统:大多数细胞呈阴性或弱阳性,阳性颗粒少而细小。 其他细胞:淋巴细胞系统、红细胞系统及巨核细胞系统的细胞均呈阴性,浆细胞、组织细胞也呈阴性,吞噬细胞有时呈阳性。 【临床意义】 主要用于急性白血病类型的鉴别:急性粒细胞白血病时,白血病细胞多呈强阳性反应;急性单核细胞白血病时, 呈弱阳性或阴性反应;急性淋巴细胞白血病呈阴性反应。 二、中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)染色 【原理】 (偶氮偶联法)血细胞中的碱性磷酸酶在pH为9.4~9.6的条件下将基质中的α磷酸萘酚钠水解,产生α—萘酚与重氮盐偶联形成棕黑色沉淀,定位于细胞质内酶活性所在之处。 (钙钴法):碱性磷酸酶在碱性条件下将基质液中β甘油磷酸钠水解,产生磷酸钠。再依次与硝酸钙、硝酸钴、硫化胺发生一系列反应,形成不溶性棕黑色的硫化钴,定位于酶活性之处。? 正常血细胞的染色反应 NAP主要存在于中性成熟粒细胞胞浆内,故中性成熟粒细胞胞浆呈阳性,其他细胞基本呈阴性。在油镜下计数100个成熟中性粒细胞,分别记录其分级情况:(-)、(+)、(++)、(+++)、(++++),分别为1、2、3、4分, 100个细胞中阳性细胞总数即为阳性率,100个细胞中阳性细胞的积分之和即为积分值。 【参考范围】 ? 阳性率﹤40%,NAP的积分值为30~130分。 【临床意义】 感染性疾病:作细菌性感染与病毒性感染的鉴别。 慢性粒细胞白血病的NAP严重减低,类白血病反应的NAP极度增高。 急性粒细胞白血病时NAP积分减低,急性淋巴细胞白血病的NAP积分多增高,急性单核细胞白血病时一般正常或减低。 再障时NAP活性增高,PNH时活性减低可鉴别。 其他血液病:恶组减低。 腺垂体或肾上腺皮质功能亢进等NAP积分可增高。 三、糖原染色(PAS),即过碘酸-雪夫反应 【原理】 过碘酸能将血细胞内的糖原氧化,生成醛基,醛基与Schiff液中的无色品红结合,形成紫红色化合物,定位于细胞质中。 正常血细胞的染色反应: 粒细胞系统:分化差的原始粒细胞阴性,分化好的原始粒细胞至中性分叶核粒细胞均呈阳性反应,并随着细胞的成熟而逐渐增强,阳性呈弥散性、细颗粒状;嗜酸性粒细胞中的嗜酸性颗粒本身不着色,而颗粒之间的胞质呈红色;嗜碱性粒细胞中的嗜碱性颗粒呈阳性,而颗粒之间的胞质不着色。 红细胞系统:有核红细胞及红细胞均呈阴性。 单核细胞系统:分化差的原始单核细胞呈阴性,其他阳性,绝大多数阳性呈细颗粒状,有时分布于细胞边缘的阳性颗粒较粗大。 【临床意义】 幼红细胞出现PAS强阳性反应可见于红血病和红白血病,有助于与其他红细胞系统疾病的鉴别。也可见于部分严重缺铁性贫血,重型地中海及巨幼细胞贫血。 急性粒细胞白血病细胞PAS反应阴性或弱阳性反应,常呈细颗粒状或均匀淡红色;急性单核细胞白血病细胞PAS反应呈弥漫性阳性而胞质边缘或伪足处阳性颗粒稍粗;急性淋巴细胞白血病的PAS反应呈粗颗粒,甚至大块状。 其他:可识别不典型巨核细胞、区分高雪细胞(阳性)与尼曼—皮克细胞、鉴别腺癌细胞等。 四、铁染色 【原理】 细胞中的铁在酸性条件下与低铁氰化钾溶液反应,生成蓝色的铁氰化钾(普鲁士蓝),定位与含铁的部位。 【

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