米糠多糖及硫酸酯化米糠多糖de体外免疫应答和抗肿瘤活性研究.pdfVIP

2015年3月 中国粮油学报 Vo1．30，No．3 第 30卷第 3期 JournaloftheChineseCerealsandOilsAssociation MaL2015 米糠多糖及硫酸酯化米糠多糖的 体外免疫应答和抗肿瘤活性研究 朱丽丹 王 莉 徐逸木 王 韧 ， 李亚男 陈正行 ， (江南大学粮食发酵工艺与技术国家工程实验室 ，无锡 214122) (江南大学食品学院 ，无锡 214122) 摘 要 以小鼠黑色素瘤细胞(B16)为抗肿瘤模型，通过MTF比色法评价米糠多糖及硫酸酯化米糠多糖 对BI6增殖抑制能力。以小鼠巨噬细胞Raw264．7细胞系为免疫模型，通过MIT比色法评价 Raw264．7增殖 能力，中性红吞噬试验评价 巨噬细胞活性，Griess方法检测一氧化氮(NO)释放量，以及酶联免疫(ELISA)检测 肿瘤坏死因子 (TNF一仪)分泌量，考察米糠多糖及硫酸酯化米糠多糖的免疫活性。研究发现：米糠粗 多糖 (RBP)和米糠多糖纯化组分(RBP2a)主要通过增强机体的免疫功能而间接抑制肿瘤细胞。质量浓度为250 g／mL时，RBP和RBP2a样 品组 的NO释放量分别为对照组的4．67、6．36倍 ，TNF一 分泌量为对照组 的 441．1、465．5倍 ；RBP直接组和间接组的B16抑制率分别为8．16％、45．55％，间接组的B16抑制率比直接组 增长458％。硫酸酯化米糠多糖(SRBP—B，SRBP—D，SRBP2a—B)一方面可以直接抑制B16增殖，质量浓度 为 1000 g／mL时，对B16抑制率达73．65％、65．53％、78．43％，另一方面也可通过免疫途径提高NO和TNF 一 仅等细胞因子释放，进一步提高抗肿瘤活性。但高浓度SRBP—B，SRBP—D，SRBP2a—B能抑制Raw264．7 增殖，在500 g／mL时，Raw264．7存活率仅为83．26％、81．8％、79．78％。 关键词 米糠多糖 硫酸酯化米糠多糖 免疫调节 抗肿瘤活性 中图分类号：Q2 文献标识码：A 文章编号：1003—0174(2015)03—0035—06 米糠是稻米加工的副产物，含有优质的蛋 白质、 米糠多糖对体外小鼠黑色素瘤细胞 (B16)抑制能力 多糖、脂肪、生育酚等生物活性物质 J。研究表明， 及小鼠巨噬细胞(Raw264．7)免疫应答作用。 米糠中活性多糖具有提高免疫能力 ]，抗肿瘤 2-5]， 降血脂-o等功能。生物活性多糖的抗肿瘤途径主要 1 材料与方法 有2种：一方面通过宿主介导提高抗肿瘤活性，即多 1．1 材料及试验细胞 糖作为生物免疫反应的调节剂 ，通过增强机体的免 脱脂米糠：万福生科 (湖南)农业开发股份有限 疫功能而间接抑制或杀死肿瘤细胞；另一方面多糖 公司；小 鼠黑色素瘤细胞 (B16)、Raw264．7(小 鼠单 对细胞有毒性，直接抑制肿瘤细胞增殖l。目前米 核巨噬细胞 白血病细胞)：中国科学院上海生命科学 糠多糖的活性研究主要集中在对肿瘤的直接抑制作 研究院细胞资源中心；胎牛血清 ：美 国 Gibico公司； 用或提高免疫活性等单一方面，将肿瘤直接抑制作 RPMI1640培养基、青霉素／链霉素、胰蛋 白酶：美国 用和免疫活性联系起来对米糠多糖抗肿瘤途径的研 Cellgro公司；DMEM(HighGlueose)：美 国Thermo公 究很少。有研究表明 J：对米糠多糖进行硫酸酯化 司；3一(4，5一二甲基噻唑 一2)一2，5一二苯基四氮 修饰，可以提高多糖的抗肿瘤活性，对体外人肝癌细 唑溴盐(MTr)、脂多糖 (LPS)：美国Sigma公司；TNF 胞 HepG2和小鼠乳腺癌细胞 EMT一6抑制能力有 一 仪检测试剂盒：美国eBoscience公司；SepharoseBig 显著增强。但是米糠