高价特异半抗原雌二醇抗体及酶标雌二醇复合物研制.pdfVIP

‘第27卷增刊 卫生研究 V01．27Supplement oFHYGIENERESEARCH 1998191 1998．年 JOURNAL A“g． 高价特异半抗原雌二醇抗体及酶标雌二醇复合物的研制 赵丹慧李成文薛延张艳 (北京市创伤骨科研究所北京骨与关节疾病研究中心，100035) 摘要目的：制备出高价特异的半抗原雌二醇抗体和高纯度稳定的雌二醇一17半琥珀酸一辣 根过氧化物酶(HRP)复合物。方法：主要使用材料包括半抗原载体复合物、半抗原活化体、HRP及 免疫用新西兰纯系家兔。具体方法为：(1)自行设计小分子半抗原的微量快速免疫方案，免疫全过 程半抗原雌二醇的总使用体重量为367．5gg／kg，免疫时间为11周。(2)首次建立活化4B珠与 BSA交联的反相快速亲合免疫吸附技术，以除去抗载体抗体，批次特异纯化了抗雌二醇抗体，(3) 改进度质醇一17半琥珀酰胺一HRP的标记法，建立了雌二醇一】7半琥珀酸一HRP标记技术。结 果：研制出高价特异的抗雌二醇抗体，效价1 5万以上、抗体的活性达5mg／Lf抗载体BSA抗体 的含量为0。首次制奋出高纯度稳定的雌二醇一17半琥珀酸一HRP复合物；用ELISA法与自制固 性为5rng／L。结论：本研究建立的半抗原雌二醇抗体及酶标雌二醇复合物的制备、纯化及分析鉴定 技术简便、快速经济，效果满意。 关键词雌二醇抗体雌二醇一17半琥珀酸一HRP微量免疫法快速亲和吸附法 and ofAntiestradiolAntobodies PreparationApplication and LabeledEstradiol Enzyme ZhaoDanhui，Li Yan Chengwen，XueYan，Zhang and and ResearchCenterofBone Instituteof OrthopaedicsBeijing (Beijing Traumatology andJoint 100035，China) Diseases，Beijing labeled specificantiestradiolantibodiesandenzyme estradiol(E2一 Objective：Toprepare HRP)．Methods：Fastandtrace affinity to immunity，Estradiol：367．5gg／kg．Fast absorption moveBSA laheledE2～17hemisuccinate—HRP．Results：Thetiterofantiestra— antibod沁s．Enzyme t corttent dioIantibodiesreached1 50000～IZ0000asmeasuredbyELISA．Ami—BSAwaszero． Theactivitiesofantibodieswere5 activitiesof