RNA病毒感染性克隆技术和其应用.pdfVIP

生 物 技 术 通 讯 LETTERSINBIOTECHNOLOGY Vol.23No.2 Mar., 2012 271 doi: 10.3969/j.issn.1009-0002.2012.02.031 综 述 RNA病毒感染性克隆技术及其应用 杨扬，谭文杰 中国疾病预防控制中心 病毒病预防控制所，病毒基因工程国家重点实验室，北京 100052 ［摘要］ 为实现对RNA病毒基因分子水平上的操作与研究，可将病毒基因组RNA体外转换成cDNA，构建出cDNA 克隆，通过cDNA克隆与重组技术实现对RNA病毒基因分子水平的修饰，从而为病毒基因组的结构和功能研究提供 有效的方法。这种方法是现代实验病毒学非常有用的工具，称为RNA病毒感染性克隆技术或反向遗传学技术。我 们对该技术及其应用进行简要综述。 ［关键词］ RNA病毒；感染性克隆；应用 ［中图分类号］ Q78; R373 ［文献标识码］ A ［文章编号］ 1009-0002（2012）02-0271-04 Infectious Cloning Platform for RNA Virus and its Applications YANH Yang, TAN Wen-Jie* State Key Laboratory for Molecular Virology and Genetic Engineering, National Institute for Viral Disease Control and Prevention, China CDC, Beijing 100052, China *Corresponding author, E-mail: tanwj28@ ［Abstract ］ To realize the operation and research of RNA virus genome at the molecular level, the viral genomic RNA could be converted into cDNA in vitro, then cDNA clones could be constructed by cDNA cloning and recom⁃ binant technology, so as to study the structure and function of viral genome achieved by the RNA virus genomic modification at the molecular level. This method is very useful tool in modern experimental virology, called infec⁃ tious cloning platform for RNA virus or reverse genetics. This infectious cloning platform for RNA virus and its ap⁃ plication were reviewed briefly in this paper. ［Key words ］ RNA virus; infectious clone; applications RNA病毒感染性克隆技术是利用病毒感染性 1 全长cDNA感染性克隆的构建 cDNA克隆研究RNA病毒结构与功能的一项新技 术 ，包括病毒基因组全长cDNA克隆构建和病毒 1.1 基因组全长cDNA的获得 RNA的感染性转录体制备及导入。该技术的发展 基因组全长cDNA的获得是感染性克隆的第一 实现了对RNA病毒在分子水平上的操作，为RNA病 步，也是最关键的一步。获得全长cDNA的一般方 毒基因组的结构和功能研究提供了有效的方法。 步骤包括引物设计、覆盖基因组全长的相互重叠的 1981年，Racaniello和Baltimore将包含脊髓灰质炎病 cDNA片段的合成、与载体相连接、根