桃核参术汤对二甲基亚硝胺致大鼠肝纤维化形成的干预作用.pdfVIP

· l04 · 中国中医药科技2011年3月第 l8卷第2期 Mar．2011Vo1．18No．2 桃核参术汤对二甲基亚硝胺致大鼠 肝纤维化形成的干预作用水 张俊杰 黄亚鹏 李寿生 陈 晓 李静洁 浙江中医药大学 ·杭州310053 河北省唐山-eg三人民医院 ·唐山063000 摘 要 目的：观察桃核参术汤对DMN致大鼠肝纤维化的干预作用。方法：采用DMN诱导的大鼠肝纤 维化模型，防治组同时用桃核参术汤干预治疗。模型组和防治组在开始注射 DMN后的第 14、28、42天杀 死动物，取血和肝组织备用。检测大鼠血清肝功能 AST、ALT ，观察各组大鼠肝组织病理学改变和肝纤 维化SSS计分变化。结果：造模4周后大鼠肝纤维化形成，6周后模型组大鼠肝组织损伤较4周时有所缓 解。与6周模型组相比，防治组大鼠血清ALT、AST水平、肝组织病理变化、肝纤维化 ssS计分均显著改 善 P 0．05或P 0．01 。结论：桃核参术汤可以显著改善肝纤维化大鼠的肝功能和肝组织病理变化， 降低肝纤维化SSS计分，具有较好的抗肝纤维化作用。 主题词 肝硬化 ／中医药疗法 @桃核参术汤／治疗应用 大鼠 肝纤维化是指肝脏 内弥漫性细盹外基质 ECM 特别是 1．5 分组与给药 随机分为正常对照组30只 按实验时问 胶原过度沉积。在 尚未发展到肝谬一 艺前，及早阻断和逆转肝 分2、4、6周对照组 ，每组各 l0只 、模型组30只 按实验时 纤维化 ，是防治肝硬化的关键…。基于以往研究采用桃核参 间分2、4、6周组，每组各 10只 、桃核参术汤组30只 按实 术汤治疗肝炎后肝纤维化和肝硬化取得了良好的临床效果， 验时间分2、4、6周防治组，每组各 1O只 。桃核参术汤2、4、 本实验通过建立二甲基亚硝胺 DMN 诱导的大鼠肝纤维化 6周组分别在造模同时以桃核参术汤 10ml／k6体重灌胃至 模型，检测各组大鼠的肝功能变化，观察大鼠肝纤维化形成 各组相应的时间段；正常对照组各组和模型组各组以生理盐 过程中肝组织的病理及肝纤维化SSS计分变化，进一步探讨 水 10ml／kg体重灌胃至各组相应的时间段。 桃核参术汤对 DMN致大鼠肝纤维化的干预作用，从而为桃 1．6 样品采集与处理 各组动物分别于实验的第2、4、6周 核参术汤在临床上能够更合理的推广应用提供科学的实验 处死。处死前禁食 124,D-,J，戊巴比妥钠40mg／kg腹腔麻醉， 依据 。 麻醉后仰卧位固定，打开腹腔，经下腔静脉采血 ，摘取肝组 1 材料与方法 织，于肝脏最厚一叶切取 1．Ocm ×1．0cm ×1．0cm肝组织 2 1．1 实验动物 清洁级SD大鼠90只，雌雄各半 ，体重 200 块，4％中性 甲醛固定，用于病理标本制备。 ±20 g，由浙江中医药大学实验动物中心提供。 1．7 观测指标与测定方法 肝功能测定：ALT、AST活性按 1．2 实验药品 桃核参术汤组方中药材购于浙江中医药大 照试剂盒说明书测定。肝组织病理学观察：固定肝组织经石 学门诊部，各方中药物均按原方配伍比例和制法 65kg成人 蜡包埋，4m厚度切片，HE染色，光镜下观察肝组织病理学 的 1El量 混合 浓缩成生药材 2．7g／ml。二 甲基亚硝胺 变化并拍照、扫描。肝纤维化SSS计分变化：按2000年 西 DMN ：天津化学试剂研究所 ，1ml，临用时用生理盐水配 安 修订的病理组织学诊断标准进行肝脏纤维化分期，纤维 成 l％浓度。肝功能 AST、ALT 测定试剂盒：上海生物制品 化程度 s 分0～4级。 研究所。 1．8 统计学处理 采用 SPSS11．5统计软件进行数据的分 1．3 实验仪器 OlympusCK40一F20o倒置显微镜 ：Olympus 析处理，行单因素方差分析。结果以 ± 表示。 OpticalCo．Ltd；Olympus—CH普通光学显微镜：日本 Olympus 2 结果 公司；725型分光光度计：上海第三分析仪器厂。 2．1 一般情况 在DMN诱导肝纤维化过程中，大 鼠的活泼 1．4 模型制备 模型组和防治组大鼠腹腔注射DMN溶液 性逐渐降低，进食渐少，行动迟缓，易激惹，体重增加缓慢，褪 1ml／kg体重 即10mg／kg体重 ，1次 ／d，每周连续 3天 ，共 4 毛，毛色变黄，尿色加深，给药抗拒性增加；4周时，大鼠腹水 周。每周称 1次体重，按体重增长相应增加药物剂量。正常 明显；停止注射 DMN后 ，大鼠活泼性逐渐恢复，进食增多，体 对照组以1ml／kg体重予以大鼠腹腔注射生理盐水，1次／d， 重增加稍快，毛发渐密，毛色转白，尿色变浅，给药抗拒性减 每周连续 3天，共 4周。 小，腹水渐少。与模型组大鼠相比，防治组大鼠的