利用免疫磁珠分离鉴定miRNA靶基因的方法研究.pdfVIP

ISSN1007—8738细胞与分子免疫学杂志 (ChinJCellMolImmuno1)2011，27(1 l01 · 论著 · 文章编号 ：1007—8738(2011)01—0101—03 利用免疫磁珠分离鉴定 miRNA靶基 因的方法研究 白久旭，王 涛，赵智凝 ，孟艳玲，郭张燕，杨安钢 (第四军医大学免疫学教研室，陕西西安710032) [摘 要] 目的：利用免疫磁珠分离鉴定miRNA靶基因，建 我们利用亲和素和生物素之间高度特异结合的 立一种经济、有效、快捷的miRNA靶基 因鉴定方法。方法： 原理，用生物素标记 miRNA，miRNA与其 目标靶基 直接提取细胞总RNA后加入生物素标记的miRNA分子共孵 因mRNA的3’UTR互补结合 。应用链霉亲和素磁珠 育，而后利用免疫磁珠分离与miRNA结合的mRNA，或将生 M-280试剂盒分离 miRNA结合的mRNA，并在反转 物素标记的miRNA分子瞬时转染 HeLa或 HepG2细胞，48h