SGKl在糖尿病小鼠肾脏皮质中时间差异性表达及意义.pdfVIP

维普资讯 · 2278· 巾国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2007，23(11)：2278—2280 [文章编号] 1000—4718(2007)11—2278—03 SGK1在糖尿病小鼠肾脏皮质中时间 差异性表达及意义木 姜华军， 刘建社， 朱忠华， 王全胜， 王玉梅， 冯玉锡 (华中科技大学同济医学院附属协和医院肾内科 ，湖北 武汉430022) [摘 要] 目的：研究血清和糖皮质激素诱导的蛋 白激酶 1(serumandglueoeortieoid—induciblekinase1， SGK1)在糖尿病 (DM)小鼠肾脏皮质中时问上差异性表达及意义。方法：采用链脲佐菌素 (STZ)单次腹腔注射诱 导小鼠糖尿病模型。将2月龄 C57BL／6小 鼠随机分成 lO组 ：第 1、2、3、4、6、8、12周糖尿病小鼠组 (DM．、DM 、 DM 、DM 、DM 、DM8、DM．)和相应的第 1、4、8周正常对照组 (N．、N 、N)。分别在DM模型制作成功后第 1、2、3、 4、6、8、12周末收集小鼠24h尿量，检测 24h尿蛋白量 ；观察肾脏病理改变；半定量 RT—PCR检测小鼠肾脏皮质 SGK1及结缔组织生长因子(CTGF)mRNA的表达，Westernblotting检测 N、DM 、DM 组皮质 SGK1、CTGF蛋 白的 表达。结果：随着糖尿病病程的进展，DM组小鼠肾小球体积逐渐增大、系膜区逐渐增宽；DM组小鼠24h尿蛋白从 第2周起开始逐渐增多，肾脏皮质SGK1mRNA表达从第2周开始明显上调，在第4周达到峰值。CTGF随着糖尿 病病程的进展表达逐渐递增。结论：SGK1在糖尿病早期肾脏表达峰值 的出现及 CTGF持续递增 的表达 ，提示 SGK1在糖尿病肾病肾脏纤维化的发生发展过程中起重要作用。 [关键词] 糖尿病肾病；蛋白激酶类 ；结缔组织生长因子 [KEYWORDS] Diabeticnephropathies；Proteinkinases；Connectivetissuregrowthfactor [中图分类号] R363 [文献标识码] A SGK1是一种与 PKB／AKT等第2信使蛋I 仃极高同 DM4、DM6、DM8、DMl2n=8、8、8、8、10、10、10)和第 1、4、8周 源性的丝氨酸／苏氨酸蛋 白激酶，它是多种细胞信号转导通 正常对照组 (N 、N4、N，n=6、6、6)。将STZ溶于pH4．8柠 路和细胞磷酸化级联反应的 1个功能性交汇点，在离子通道 檬酸缓冲液中，按 130mg·kg 对 DM组小 鼠进行 1次性腹 调节 、细胞增殖、存活的信号转导中起重要作用 。已有研 腔注射，同时N组腹腔注射等量无菌柠檬酸缓冲液。注药后 究表明SGK1与糖尿病 肾病肾脏纤维化关系密切 。SGK1 72h尾尖取血，测血糖 16．7mmol·L 者确定为糖尿病诱 在糖尿病肾病肾脏组织中的表达模式 目前尚未见相关报道， 导成功。实验结束时，因DM．组小鼠存活率低，不具有统计 本研究以STZ诱导的C57BL／6糖尿病小鼠为动物模型，观察 学意义，剔除该实验组。 SGK1在糖尿病肾病肾脏皮质中的表达，并检测SGK1表达改 3 样品采集 变时伴随着CTGF表达的变化，初步探讨 SGK1在糖尿病肾 在DM造模成功后第 1、2、3、4、6、8周末分别检测相应 N 病发生发展中的作用。 组及DM组小鼠的体重、24h尿量及尿蛋白。处死小鼠，取双 肾组织，剥离被膜，测量小鼠肾重，计算肾重／体重；左肾固定 材 料 和 方 法 于 10％的中性甲醛中，石蜡包埋 ；右肾冻存于一7O℃冰箱中 1 药物与试剂