参麦注射液对缺氧心肌细胞凋亡的影响.pdfVIP

维普资讯 · 660 · 中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2007，23(4)：660—663 [文章编号] 1000-4718(2007)04—0660—04 参麦注射液对缺氧心肌细胞凋亡的影响 郝 然 ， 娄金丽 ， 张允岭 ， 郑 宏 ， 黄启福 (北京中医药大学病理学教研室，北京 100029；北京中医药大学东方医院实验中心，北京 100078) [摘 要] 目的：观察参麦注射液对体外培养的心肌细胞缺氧后细胞凋亡 的影响，并探讨其可能机制。方 法：分离乳鼠心肌细胞，进行离体培养。用95％N 与5％CO 混合气体造成缺氧环境，建立体外细胞缺氧模型，使 细胞分别缺氧6h和 12h。参麦注射液治疗组于缺氧处理前24h至缺氧结束加入5mL／L参麦注射液进行干预。 首先通过AnnexinV—FITC／PI双染法，流式细胞仪检测细胞凋亡情况。继而使用M1Tr法观察心肌细胞线粒体活 性的改变，并应用激光共聚焦显微镜观察线粒体膜电位，荧光酶标仪检测胞浆内caspase3、7的活性。结果：随着缺 氧时间的延长凋亡细胞增多，参麦注射液能增强缺氧细胞的线粒体活性，维持线粒体膜电位，抑制 caspase3、7的激 活，从而减少凋亡细胞(P0．01)。结论：缺氧可以通过线粒体途径诱发心肌细胞的凋亡，参麦注射液能减少缺氧 后细胞凋亡的发生，其机制与维持线粒体膜电位稳定，抑制caspase酶激活，即抑制凋亡的线粒体途径有关。 [关键词] 缺氧；细胞凋亡；线粒体；参麦注射液 [中图分类号] R363 [文献标识码] A TheeffectofShenmaiinjectiononcardiacmyocyteapoptosisafterhypoxia HAORan，LOUJin—li，ZHANGYun—ling，ZHENGHong，HUANGQi—fu (DepartmentofPathology，BengUniversityofChineseMedicine，Beng100029，China；CenterofScienceExperiment， DonffangHospitalofBeringUniversityofChineseMedicine，Beng100078，China) [ABSTRACT] AIM：ToobservetheeffectofShenmaiinjection，achinesemedicine，onapoptosisofcardiacmyo- cytesafterhypoxia．M ETHODS：Cardiacmyocyteswereseparatedfrom neonateratheartandcultivatedinvitro．Hypoxia conditionwasinducedbymixtureof95％N2and5％CO2．Cellswereexposedtohypoxiafor6hor12 hnadtreatedwith Shenmaiinjection(5mL／L)from24hbeforehypoxiauntiltheendofhypoxia．First，apoptosisWas detectedwithAnnexin V—FITCandPIstainingbyflowcytometry．Then．theactivityofcradiacmyocytemitochondriaWas observedbyMTrmeht— od．Mitochondriamembranepotentialandtheactivityofcaspase3，7werealsomeasuredbylaserscanmicroscopyand multi—detectionmicroplatereader，respectively．RESULTS：Theapoptoticcellsbecamemoreandmorewithprolonged hypoxia．Shenmaiinjectionenhancedmitochondriaa