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抗-HCV EIA S/CO比值与确证试验阳性的相关性研究进展 丙型肝炎病毒 (HCV) 是1989年被发现的，1990年美国第一代抗-HCV酶联免疫诊断试剂 (EIA)获得美国食品药品管理局 (FDA) 批准[1]，目前第三代试剂的灵敏度和特异性都有很大提高。我国的抗-HCV诊断试剂自1993年面世以来，经广大科技工作者和生产单位努力，经过国家“八五”、“九五”攻关，其质量也不断改进[2]。 但在HCV低流行率人群中，如无偿献血者中，抗-HCV EIA试剂的假阳性问题一直比较突出[3-5]。美国疾病控制预防中心 (CDC) 的研究表明[6]，获美国FDA批准的Abbott HCV EIA 2.0及Ortho HCV 3.0 EIA在抗-HCV阳性率10%的各类人群中 (包括献血者中)，假阳性率平均为35%。因此，美国CDC曾于1998年建议HCV抗体筛查阳性结果需进一步采用确证试验确证后方可报告[7]。 1. 抗-HCV EIA产生假阳性的原因 抗-HCV EIA产生假阳性的主要原因是：(1) 高IgG血症：目前国内外的抗-HCV EIA试剂均采用间接酶联免疫检测原理，间接法的一个重要影响因素是血清中所含的高浓度的非特异性IgG，IgG对聚苯乙烯有较强的吸附力，非特异性IgG可吸附到固相载体上或包被的抗原上造成假阳性；(2) 类风湿因子的干扰：类风湿性关节炎患者血清或血浆中的类风湿因子为巨球蛋白IgM，可非特异性地吸附到固相载体上或包被的抗原上造成假阳性；(3) 超氧化物歧化酶 (SOD) 的干扰：如第一代EIA试剂所含的重组基因片段C-100为酵母菌产生的SOD融合蛋白，标本中SOD升高会造成抗-HCV假阳性结果; (4) 用于试剂制备的HCV抗原不纯[8-10]。用于生产抗-HCV EIA的HCV抗原主要有HCV核心区、NS3、NS4及NS5区蛋白，均为基因工程产物，如抗原的纯度太低，可产生非特异性反应[2]。 2. 确证方法及试剂 目前用于抗-HCV确证的方法有两类，即抗-HCV血清学检测或HCV RNA核酸扩增检测 (NAT)。 (1) 抗-HCV血清学检测确证试剂：获美国FDA正式批准的抗-HCV血清学检测确证试剂只有一种，即美国Chiron公司的第三代重组免疫印迹法试剂 (Chiron HCV RIBA-3 SIA, Chiron Corp., Emeryville, CA)。其它市售的确证试剂还有Abbott的Matrix (MATRIX HCV 2.0, Abbott Laboratories, Chicago, IL，免疫印迹法试剂)、Organon的Liatek(Liatek-III, Organon Teknika, Boxtel, The Netherlands，第三代免疫印迹法试剂)、Inno-LiaTM HCV Ab III(Immuno Diagnostic Oy)、Murex Western blot (Wellcozyme Murex blot, Murex Diagnostics, Dartford, UK ，现为Murex Biotech, Abbott Laboratories) 、BIO- RAD 公司的DECISCAN HCV PLUS、 Genelabs公司的WB等[11-14]。 (2) HCV RNA NAT检测试剂：获美国FDA正式批准的HCV RNA RT-PCR定量核酸扩增检测试剂有Roche公司的AMPLICOR HCV Test, Version2.0及Roche公司的COBAS AMPLICOR HCV Test, Version2.0[15]；2002年获FDA批准的用于献血者血液筛查的HCV核酸检测 (NAT)试剂：Chiron公司的基于转录介导扩增 (TMA) 技术的Procleix HIV-1/HCV Assay检测系统，用于16 人份献血者血浆混合检测或单人份血浆检测，Roche公司的基于RT-PCR-ELISA的COBAS AmpliScreen检测系统，用于24 人份献血者血浆混合检测或单人份血浆检测。此外，还有许多诊断试剂厂家提供用于研究的HCV RNA NAT试剂；有些实验室则用自己的方法和试剂进行NAT检测。 3．抗-HCV EIA S/CO比值与确证试验阳性结果的相关性 Toble等[16]对美国无偿献血者人群中第一代HCV EIA 1.0试剂检测结果的回顾性分析表明，其S/CO比值与RIBA2.0阴性或阳性结果之间存在显著相关性，S/CO≥2.5时，可预测75%的确证试验RIBA 2.0阳性。此外，美国CDC[6]分析了不同HCV感染率人群中两种EIA试剂 (Abbott公司的 HCV EIA2.0及Ortho公司的 HCV Version