大黄鱼gdf-8Ⅱ开放阅读框序列克隆和分析.pdfVIP

第 22卷 第 1期 宁 波 大 学 学 报 (理 工 版 ) 、 、，01．22 NO．1 2009年 3月 JOURNALOFNINGBOUNIVERSITY(NSEE) Mar． 2009 文章编号：1001．5132(2009)01—0039—05 大黄鱼gdf-8II开放阅读框序列克隆及分析 孙 升，薛良义 ，童丽娟 (宁波大学 应用海洋生物技术教育部重点实验室，浙江 宁波 315211) 摘要：GDF8是动物肌肉发育和生长过程中的负调控因子，对gaf-8的研究将有助于促进重要养 殖鱼类大黄鱼的遗传育种．在 已克隆大黄鱼 gdf-8I的基础上，采用 同源克隆策略，首次克隆了 2357bp的大黄鱼gdf-8II开放阅读框序列(0RF)，它由3个外显子、2个内含子组成，编码 359 个氨基酸，其中外显子III与大黄鱼gdf-8l的外显子 III序列相似度较高，这提示外显子 lII受到 了高度 的进化限制及其功能的重要性．基于 gaf-8推导的氨基酸序列构建的系统树显示鱼类的 gdf-8II是与gdf-8I不同的基因，有必要对gdf-8II基因进行进一步的研究． 关键词：大黄鱼；gdf-8II；开放阅读框 ；克隆 中图分类号：O75 文献标识码：A 20世纪 90年代发现生长分化因子一8(Growth 的研究则处于起步阶段，仅在金鲷(Sparusaurata)、 andDifferentiationFactor-8，GDF．8)对生长具有负 斑马鱼(Daniorerio)等少数几种鱼类中克隆获得其 调控作用，gdf-8敲除的小鼠，其骨骼肌重量明显增 完整的编码序~lJ[5,6,17-19]，国内目前还没有这方面 加，是正常野生型小鼠的 2倍左：右1【]．突变小鼠骨 的相关报道． 骼肌肥大的原因既有肌细胞的增生也有肌纤维的 根据研究，gdf-82种异构体在序列的长度、相 肥大．随后 gdf-8的功能在双肌牛品种比利时蓝牛 似度及时空表达等方面存在一定的差异 ，，们．在 (BelgianBlue)和皮尔蒙特牛(Piedmontese)得到进 目前对 gdf-8I进行较为深入研究的前提下，为更 一 步证明2【1．该基因在动物育种中的潜在应用价值 好地阐明gdf-8对鱼类骨骼肌生长的作用机制及该 日益得到动物育种学家的关注． 基因的其他功能和特点，有必要对gdf-8II进行深 近年来发现某些鱼类在系统发生过程中，有 入的研究． 基因重复现象发生，导致gdf-8产生 2种异构体l3J． 本文在已获得大黄鱼 g,af-8I基础上，采用同 目前，对鱼类gdf-8I的研究较为深入，已在多种鱼 源克隆策略，首次克隆了大黄鱼gdf-8II开放阅读 类中克隆到gdf-8IL3川，本实验室也已克隆了大黄 框序~Jt(OpenReadingFrame，ORF)，并对其结构、 鱼gay-8I的全长序Yt](AY842934)川，而对gdf-8II 序列进行了分析． 收稿 日期：2008—03．17． 宁波大学学报 (理工版 )网址：http：／／3xb．nbu．edu．cn 基金项目：国家 863计划项目 (2006AA10A405)；浙江省 自然科学基金 (Y306295)；宁波市 自然科学基金 (2006A610083)； 浙江省教育厅新苗人才计划项 目 (2007R40G2070027)；宁波大学科研基金 (XK0613041)． 第一作者：孙 升 (1983一)，男，浙江台州人，在读硕士研究生，主要研究方向：海洋生物分子生物学．E-mail：ksun1983@gmail．com 通讯作者：薛良义 (1962一)，男，浙江宁波人，博士／教授，主要研究方向：水产生物基因资源与遗传育种．E·mail：xueliangyi@nbu．edu．cn