基质固相分散_液相色谱法测定血豆腐中激素.pdfVIP

周建科, 宋歌, 张明翠, 刘瑞英 (河北大学理化分析中心,河北省分析科学技术重点实验室, 河北 保定, 071002) 采用基质固相分散样品前处理方法,高效液相色谱 时测定血豆腐中雌三醇、诺龙、甲基睾丸酮、己烯 雌酚 4种激素。考察了分散剂种类、样品与分散剂质量比、洗脱剂及洗脱体积对测定结果的影响。色谱条件为: D ikmaC 柱( 5m, 250mm 46mm id), 流动相为 V ( 甲醇) V ( 四氢呋喃) V (水) = 60 10 30。4组分线性相 18 关系数为 0999 8- 0999 9。样品检出限为 0025- 01g/g ( S/N= 3), 回收率 830% - 940% 。 基质固相分散, 液相色谱, 血豆腐, 激素 蛋白同化激素是具有性激素活性的同化剂, 它能 id); 流动相: V ( 甲醇) V ( 四氢呋喃) V (水) = 60 够促进动物生长,在特定的饲喂期间可引起蛋白质沉 10 30; 流速: 10 mL/m in; 检测波长: 雌三醇 280 积, 从而提高饲料转化率。20世纪 70年代以前, 许 nm, 诺龙、甲基睾丸酮、己烯雌酚 241 nm;柱温:室温; 多国家和地区均将其用作畜禽的促生长剂。但毒理 进样量: 20 L。采用色谱峰的保留时间定性, 外标法 研究表明这些药物可能诱发癌症, 干扰生殖系统、神 峰面积定量。 [ 1- 2] 经系统、免疫系统 。包括我国在内的绝大多数国 13 [3- 7] 准确称取雌三醇、诺龙、甲基睾丸酮、己烯雌酚标 家已禁止将蛋白同化激素用作动物促生长剂 。 若非法将这类药物用于畜禽、水产养殖, 导致药物在 准品各20mg, 用乙醇配制成质量浓度为 10mg/mL 动物体内及动物性食品中的残留, 将危害人类健康。 标准储备液, 4! 冰箱存放。标准工作溶液:用乙醇逐 因此,快速有效的检测动物源食品中蛋白同化激素残 级稀释标准储备液。 留量很有必要。血豆腐是人们日常食用的大众食品, 14 有关血豆腐中蛋白同化激素的测定尚未见报道。本 准确称取 10 g样品和 20 g分散剂,放入研钵, 文采用基质固相分散技术处理样品, 高效液相色谱检 轻轻研磨, 将研磨好的混合物装填到可加压磨口玻璃 测血豆腐中的雌三醇、诺龙、甲基睾丸酮、己烯雌酚 4 层析柱中, 柱底和柱顶均加一圆形滤纸片, 用注射器 种蛋白同化激素, 效果良好。 塞轻压使装填紧密。先用 4mL 二次水冲洗, 去除其 中的水溶性物质, 再用4mL正己烷冲洗, 去除其中的 1 实验部分 脂溶性物质, 最后用 80mL 甲醇洗脱目标化合物, 收 11 集洗脱液过 045 m 滤膜, 滤液置 40! 水浴, 氮气流 LC10 T 高效液相色谱仪 ( 日本岛津公司), 吹至 02 mL, 取浓缩液 20 L进样分析。 SPD10 紫外检测器; 7725i型手动进样阀, N2000 2 结果与讨论 双通道色谱工作站 (浙江大学智能信息工程研究 所), UV265紫外可见分光光度计 (日本岛津公司)。 21 雌三醇、诺龙、甲基睾丸酮标准品( Sigm a公司); 用UV265紫外分光光度计分别对 4组分进行 己烯雌酚标准品(