熊果酸和齐墩果酸对胰脂肪酶活性及构象的影响.pdfVIP

ANDMATERIAMEDICARESEARCH MEDICINE 2009VOL．20NO．10 时珍国医国药2009年第20卷第lO期HSHIZHEN 熊果酸和齐墩果酸对胰脂肪酶活性及构象的影响 刘志芳，田萌，马跃文，李政，李黎，刘克武+ (四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室，i四)Jl成都610064) 摘要：目的研究熊果酸(uA)和齐墩果酸(oA)对胰脂肪酶(LPS)活性和构象的影响。方法采用紫外光谱法、荧光光谱 光谱发生改变。荧光淬灭结果显示UA作用后，LPS的荧光发生淬灭，且淬灭的机制为静态淬灭和动态淬灭组合的淬灭 抑制LPS的活性、影响LPS的构象，且UA对LPS的构象影响及抑制作用更加显著。 关键词：熊果酸； 齐墩果酸；胰脂肪酶； 紫外光谱； 荧光光谱； 圆二色谱 中图分类号：0657．3文献标识码：B 文章编号：1008-0805(2009)10-2600-03 2．2．2 圆二色(CD)谱测定样品池光程为0．1cm，在室温下 脂肪酶(1ipase，简称LPS)是一种特殊的酯键水解酶，广泛 存在于动物组织、植物种子和微生物体中，它能催化天然底物油 测定波长范围190—250rim的CD谱。CD谱用平均残基摩尔椭 脂水解，产生脂肪酸和甘油…。 熊果酸(ursolicacid，UA)和齐墩果酸(oleanolicacid，OA) 值。得出CD谱后，用该仪器附带的杨氏方法软件计算脂肪酶的 为同分异构体，均属于五环三萜类化合物，广泛存在于中草药中， 二级结构含量。LPS浓度为1×10moVL，实验时三萜类小分 且具有多种生物活性拉l。OA和UA都具有一定的降脂作用，能子与LPS的终摩尔比为0／1，0．4／1，3／1。 够有效地降低高脂血症小鼠的血脂¨oj，有望开发成新型降脂3结果与讨论 3．1 药。但OA和UA降脂作用的强弱的比较及降脂作用机理尚未见 报道。本文采用紫外光谱、荧光光谱和圆二色谱等方法，研究了 UA和OA对LPS活性及构象的影响，比较了uA和OA对LPS抑的抑制作用．抑制作用随UA，OA浓度的升高而增强。在相同浓 制作用的强弱，为探寻OA和uA降脂作用机理，将其开发为一种度下，uA的抑制作用大于OA。 双成分降脂新药提供理论参考。 1 仪器与试剂 1．0 一 F一4500荧光光谱仪(日立)。TU一1800紫外可见分光光度 量0．8 计(北京普析通用仪器公司)。JASCO—J一810圆二色谱仪(日本睡 JASCO公司)。齐墩果酸和熊果酸购自陕西森弗生物技术有限 譬㈨ 公司，胰脂肪酶购自Sigma公司；其余试剂均为国产分析纯。 罂 O_4 2方法 0 2．1 UA，OA对LPS活性的影响 浓度C／mm01·一 图l 熊粜酸和齐墩果酸对胰脂肪酶活性的影响 2．1．1 UA。OA对LPS的抑制作用酶活性测定采用铜皂法口】。 2．1．2 3．2 UA，OA对LPS的抑制动力学研究在酶的反应体系中 分别加入不同浓度的uA和OA，改变底物橄榄油的浓