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第二十六章　毒理学实验基础 第一节　毒理学实验设计要求 目的和意义 毒理学实验设计内容 确定实验动物及数量 确定剂量或浓度 重复原则 随机分组原则 对照原则 伦理原则 一、确定实验动物（一）实验动物物种的选择 对实验动物物种选择的基本原则是： 选择对受试物在代谢、生物化学和毒理学特征与人最接近的物种； 自然寿命不太长的物种； 易于饲养和实验操作的物种； 经济并易于获得的物种。 （二）实验动物品系的选择 品系(strain)是指用计划交配的方法，获得起源于共同祖先的一群动物。 作为一个品系应具备以下条件： 相似的外貌特征 独特的生物学特性 稳定的遗传性能 具有共同遗传来源和一定的遗传结构 1、实验动物按遗传学控制分类 近交系动物 远交系动物 实验动物 突变系动物 杂交群动物 （1）近交系动物(inbred strain ) 近交系( inbred strain )： 指至少经连续20代以上全同胞交配或亲子交配培育而成，品系内所有个体都可追溯到起源于20代或以后代数的一对共同祖先，近交个体的基因纯合程度可达98.6％以上的遗传群体。 近交系的特征 基因纯合性( homozygosity ) 遗传稳定性( stability ) 遗传同源性( isogenicity ) 表型一致性( uniformity ) 个体性( individuality ) 可分辨性( identification ) 分布的广泛性 资料可查性 近交系动物的应用 与远交原种相比，近交系动物个体之间极为一致，对实验反应一致，可以消除杂合遗传背景对实验结果影响。因此在实验中，实验组和对照组都只需少量的动物。 在某些涉及组织、细胞或肿瘤移植的实验中，个体之间组织相容性一致与否是实验成败的关键，在这里，近交系动物成为必不可少的实验材料。 有些近交系具有一定的自发或诱发肿瘤发病率，或其他先天性异常，这些品系可能成为生理、胎胚发育和医学研究的模型。 多个近交系同时使用，可使不同研究者分析不同遗传组成对某项实验的影响，或者观察实验结果是否具有普遍意义。 （2）突变系动物 (mutant strain ) 突变系动物是具有特殊突变基因、并伴有各种遗传缺陷的品系动物。 在长期繁殖过程中，动物的子代突然发生变异，变异的基因位点又可遗传下去，或者即使没有明确的基因位点，经淘汰和选育后，仍能维持其稳定的遗传性状。这种变异并能继续保持遗传基因特性的品系动物，称为突变系动物。 特点 突变系动物可以作为人类疾病的动物模型而在生物医学的研究中应用。 众多的突变系动物的出现给生物医学研究提供了重要的工具-疾病模型，有不少突变品系动物的疾病与人类疾病极为相似。 多为病态，生活能力较差，对饲养管理要求更为严格，繁殖保种较为困难。 （3）封闭群动物（ closed colony） 封闭群动物又称远交系，是指一个动物种群，在5年以上未从外部引进其他任何新血缘品系，是由同一血缘品系进行随机交配，并在固定场所保存繁殖的动物群。 常见者如： NIH小鼠、Wistar大鼠、KM小鼠、青紫蓝兔、新西兰兔和豚鼠等，均属这类动物。 特点： 一定的杂合性：不引入新的基因，又不使 群体内基因丢失。 相对的稳定性：群体在一定范围内保持相 对稳定的遗传特征。 个体差异取决于祖代动物。 较强的繁殖力、抗病力。 群体易保存有模型价值的突变基因。 （4）杂交群动物(hybrid stock ) 杂交群动物又称异系杂交或系统杂交动物，是两个近交品系动物间有计划进行交配获得的第一代动物，亦称杂交一代，简称F1代动物。 特点： a 杂交优势，克服了近交引起的近交衰退 b 遗传与表型上的均质性 c 分布广泛。 d不具有育种功能 （三）实验动物等级的选择　 实验动物的微生物标准化程度。 1、无菌动物（germfree animal，GF）： 指用现有检测技术在动物体内外的任何部位均检不出任何活的微生物和寄生虫的动物。来源于剖腹产或无菌卵孵化，饲养于隔离系统中。 2、悉生动物(gnotobiotic animal GN) 悉生动物：或称已知菌动物，广义上把无菌动物、已知菌动物、无特定病原体动物统称悉生动物；狭义上指已知菌动物。 3、无特定病原体动物 (SPF) : 指动物