刺激物洗脱对马兜铃酸Ⅰ所致肾小管上皮细胞增殖抑制作用影响.pdfVIP

生国查液渔业至迦Z生垦目筮昼鲞箍墨期逝垫曼盟＆幽逊Q￡壁!趔匦蠡幽，△丛盟匹12，2衄，逝：鱼№：墨 ‘431’ ·基础研究· 刺激物洗脱对马兜铃酸一I所致肾小管上皮细胞增殖抑制作用的影响 周 娜1 杨 莉， 商 朴：唐嘉薇1王璇z 李晓玫， 【摘要】目的以体外培养的人近端肾小管上皮细胞系(HK-2)为研究对象，探讨刺激物马兜铃酸一I被 洗脱(aristolochicacid—I，AA-I)后对HK一2细胞增殖抑制作用的影响。方法以从一1分别刺激细胞12、 24、48h后去除刺激物，加入Hank’s液对细胞进行重复3次洗涤，继续培养24h后测定各项指标。台盘 u 兰染色后细胞计数法观察存活细胞增殖反应；流式细胞仪分析细胞周期变化情况。结果 应用AA—I(10 g／m1)*lJ激HK一2细胞后，随着刺激时间的延长存活细胞数量逐渐减少，12、24、48h后存活细胞计数较对照 组分别下降8％、25％和57％；细胞周期测定结果显示AA-I刺激HK-2细胞后，G2／M期细胞比例逐渐增高， 到24h后G2／M期比例达对照组的1．28倍，48h后达正常对照组的3．8倍。以上情况在洗脱以后并没有得到 改善，表现为洗脱后的12、24、48h组细胞数较相应时间点的刺激组分别下降45％、32％和30％；从的G2／ M阻滞作用在洗脱以后也没有好转，洗脱24h组G2／M比例达AA24h组的2．91倍，而与AA48h组差异无显著 p 性。结论 AA-I(10 g／m1)能够显著抑制HK-2细胞的增殖，表现为细胞数目减少，细胞周期阻滞于G2／M 期。洗脱细胞外的AA-I后并未能改善AA-I刺激导致的细胞增殖抑制作用，提示细胞内蓄积的AA—I或其代 谢物可能是导致细胞持续损伤的主要原因。 【关键词】马兜铃酸一I；肾小管上皮细胞；细胞增殖；细胞周期 中图分类号：R692．6文献标识码：A of删oehieacid-1induced lifterremovalofthestimulantinrenaltubular Changes inhibition proliferation cellcultureZHoU n。sHANGP氓1’ANG iRenalDirision, epithelial Na,YANG Jia．wei,wANGXuan,UXiao．meL Fist School 100083, PekingUniversityHo印imlBering100034,2PekingUniversityofPharmaceuticalSciences,BeOmg China theculturedhumanrenaltubular stimulatedwith cells(HK-2cells)wele [AImract]nl删After epitllefial aristolochic fora of12-48hours．whetherremovalofAA．1inculturemediacanlessenthe acid．1(AA．11period culturedand withAA—lfor or48 proliferationinhibitioneffectofAA．1．MemodsHK-2cellswere stimulated 12．24 hours．washedwithHank’Ssolutionfor3times．andthen