p16基因和口腔鳞癌发生发展关系的研究.docVIP

p16基因与口腔鳞癌发生发展关系的研究 p16基因与口腔鳞癌发生发展关系的研究 作者：韩 晶 刘红梅 （综述） 张东升 （审校） 【关键词】 口腔鳞癌 对于抑癌基因来说，除了p53在口腔鳞癌发生中有重要作用，p16的异常改变与口腔鳞癌的发生也有密切关系。p16又称多种肿瘤抑制基因（multiple tumor suppressor，MTS），是第一个发现的最直接抑制肿瘤细胞发生的细胞固有成分，它是通过直接、专一地抑制细胞周期CDK4CDK6起作用的基因，它属于细胞周期蛋白依赖性抑制因子（CKI）的一种:CKI是一类小分子蛋白质，通过抑制CDK活性对细胞周期起负性调节作用，可以分为两个家族:（1）CIP/Kip家族，包括p21、p27、p57，它们抑制现已知的大多数CDK/cyclin的磷酸化激酶的活性;（2）ink4家族，包括p15、p16、p18等，它们特异性地抑制cyclin/CDK4（CDK6）的磷酸化激酶活性。p16基因不仅在口腔鳞癌中，还在多种肿瘤中发现有缺失、点突变、甲基化等异常改变，因此在肿瘤的研究中被认为是一个颇具吸引力的抑瘤基因。 1 p16基因的结构 现已确定p16基因位于人第9号染色体短臂2区1带（9p21）上，全长8.5kB，由2个内含子和3个外显子组成。两个内含子将编码序列分为三个部分:第一外显子由126bp构成，第二外显子307bp，第三外显子仅11bp。E1有Α、Β两种。Α转录子可直接编码有活性的p16蛋白;Β位于p16E1Α上游30kB处，编码13.8kD蛋白，参与控制p16表达水平的反馈调节。E1E2这两个外显子构成97%的编码序列。 p16基因的编码产物为148个氨基酸组成的蛋白质，分子量为15.845道尔顿，故称p16蛋白。p16蛋白含有四个独特的锚蛋白（ankyrin）重复结构，这一构型由307个氨基酸残基组成，主要为E2编码，该结构与其活性维持有关。 2 p16基因的功能与调控 p16既是细胞周期有效调控者，又是抑制肿瘤生长的关键成分，细胞增殖周期分为4个时期:G1期、S期、G2期和M期，其中G1-S期和G2-M期是各时期转换的两个检测点，主要受细胞周期蛋白（cyclin）、周期蛋白依赖性激酶（CDK）和周期蛋白依赖性抑制因子（CKIs）等调节。 CDK是调节控制的关键，其本身并无活性，CDK与Cy-clin结合后才能激活，促进细胞周期进展，也能与CKI结合，抑制细胞周期。当CDK和cyclin发生作用时，CDKcyclin复合体处于活性状态，继而作用于底物Rb蛋白，使Rb蛋白磷化失活，并释放转录因子E2F，从而完成G1-S期过渡。当p16和CDK4CDK6结合后，特异性抑制CDK4 CDK6的活性，使之不能解除Rb基因对转录因子的抑制，从而阻止细胞从G1期进入S期，抑制细胞增殖，阻止细胞生长。p16和cyclin（主要是cyclin D）与CDK4CDK6的结合是一种竞争性的。正常情况下二者这种竞争性结合保持平衡，使细胞的增长、分化协调进行。在致癌因素发生作用时，基因不能正常的表达，这种平衡打破，从而使细胞失去控制，向癌变发展。 目前的研究认为p16基因的表达受bmi-1的负调控，受Ets1和Ets2的正调控 ［1］ 。同时，p53蛋白的功能与RB蛋白的功能密切相关。p16蛋白对细胞增殖的抑制作用至少部分依赖于RB蛋白功能的异常［2］ 。因此，p16与Rb之间的相互协调作用也是保证细胞周期正常由G1期进入S期的关键因素之一，打破这种稳态将直接导致细胞异常增殖，发生癌变。 3 p16基因在口腔鳞癌发生发展中的失活机制 p16基因的异常改变发生在多种肿瘤当中，在口腔鳞癌中失活的主要表现为:基因的缺失、点突变、甲基化、RNA剪接加工错误。 3.1 基因的缺失 基因的缺失是基因改变的主要形式，比基因的突变常见。其中纯和性缺失要比杂和性缺失多见，主要发生在exon1和exon2。王文霞等人 ［3］ 研究MTS1基因的纯合性缺失情况时发现:30例癌前病变和正常对照标本均扩增出exon1和exon2产物，说明无MISI基因的纯合性缺失。在45例SCC标本中，有7例exon1缺失，8例exon2缺失，其中5例标本中exon1和exon2同时缺失，MTSI基因总的缺失率是22.2%（10/45）;正常黏膜和癌前病变中未发现基因突变，而鳞标本中仅有3例exon1突变和1例exon2突变，总突变率为8.9%（4/45）;MTS1基因总变异率（包括突变和缺失）为31.1%（14/45）。 3.2 基因的突变 p16基因的突变主要是点突变，主要是在exon2发生的频率不