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大蒜核型分析.doc
实验植物染色体组型分析
、实验目的
1.
2. 观察有丝分裂各时期染色体的形态变化,了解有丝分裂全过程。
3.观察分析植物细胞有丝分裂中期染色体的长短、臂比和随体等形态特征;学习染色体组型分析的方法。
二、实验原理
植物根尖的分生细胞的有丝分裂,每天都有分裂高峰时间,此时把根尖固定,经过染色和压片,再置放在显微镜下观察,可以看到大量处于有丝分裂各时期的细胞和染色体。三、实验材料
.用具:载玻片,盖玻片,,温度计,试剂瓶,镊子,解剖针,纸剪刀,绘图纸。
.药品:固定液,无水酒精,70%酒精、步骤
将鳞,待根长到2.0 cm左右时在,放入冰箱(0—4 ℃)中处理24。处理的作用,主要是阻碍纺锤丝的形成,使染色体缩短,改变细胞质的粘度,在压片时,有利于染色体的分散。经过处理的根尖,再放到液固定24以内。固定材料可以转入70%酒精中,在4℃冰箱中保存,保存时间最好不超过个月。固定的目的在于将细胞迅速杀死,使细胞结构尽可能保持原来的状态。解离方法:从固定液中取出根尖,用蒸馏水漂洗,再放到①1mol/L HCl中,在60℃水浴中恒温解离8—10压清洁的、显微照相、冲洗和放大
10×40倍10×100倍的油镜),然后冲洗,选取图像清晰的底片,放大、洗印出染色体形态清晰的照片。在显微照相的同时,对镜台测微尺进行同样倍数拍摄,放大,然后根据照片上的实际长度,计算放大倍数。
、测量放大照片根据测量、记录染色体形态测量数据:绝对长度=放大的染色体长度放大倍数染色体组总长度=该细胞单倍体全部染色体长度(包括性染色体)之和
相对长度染色体长度染色体组总长度×臂比=长臂长度短臂长度
着丝粒指数短臂染色体长度×配对:根据测量数据,即染色体相对长度、臂率、着丝粒指数、次缢痕的有无及位置、随体的形状和大小等进行同源染色体的剪贴配对。
、排列:染色体对从大到小长染色体短臂的在前具随体染色体、性染色体可单独排在最后异源的染色体要分别排列(如小麦的A、B、D染色体组)、剪贴:短臂向上、长臂向下,各染色体的着丝粒排在一条直线上。、分类: /短臂) 形态类型1~1.7中着丝粒染色体1.71~3.0近中着丝粒染色体3.01~7.0 近端着丝粒染色体7.01T端着丝粒染色体随体染色体、填表、综合描述计数体细胞染色体数目统计细胞数30,85%具有恒定一致的数目;
⑵以分裂中期高质量的体细胞染色体图像作为形态描述,以5个以上的细胞染色体,Kuo等的方法,以染色体相对长度系数(I.R.L)组成划分染色体的长短,即I.R.L≥1.26为长染色体(L);1.01≤I.R.L≤1.25为中长染色体(M2);0.76≤I.R.L≤1.00为中短染色体(M1);I.R.L﹤0.76为短染色体(S)。2n=24=8L+2M2+10M1+4S。
相对长度系数(I.R.L)= 每条染色体染色体染色体组型分类:核型1A为最对称型4C为最不对称型2n=2x=10=8M(2Sat)+2SM=6M+2SAT+2SM
⑺染色体组型模式图:根据各染色体的相对长度平均值绘制一坐标图。横轴上标明各染色体序号,每一染色体与其序号相对应,纵轴表示相对长度值(%),零点绘在纵轴的中部,并与各染色体的着丝点相对应。此即为该细胞的模式图。
染色体形态测量数据表 染色体序号 项目 长臂长度
q 短臂长度
p 染色体全长
q+p 臂比q/p 染色体类型 1 实测值(mm) 5 绝对长度(um) 4.88 8.55 2 实测值(mm) 4.5 绝对长度(um) 4.39 7.69 3 实测值(mm) 4 绝对长度(um) 3.9 6.84 实测值(mm) 4.5 绝对长度(um) 4.38 实测值(mm) 3.5 3.5 7 1 M 绝对长度(um) 3.41 3.41 6.83 相对长度(%) 5.97 5.97 11.97 6 实测值(mm) 3.5 3 6.5 1.167 M 绝对长度(um) 3.41 2.93 6.34 相对长度(%) 5.97 5.14 11.39 7 实测值(mm) 4.3 2 6.3 2.15 SM 绝对长度(um) 4.19 1.95 6.14 相对长度(%) 7.34 3.42. 10.76 8 实测值(mm) 3.5 2 5.5 1.75 SM 绝对长度(um) 3.41 1.95 5.36 相对长度(%) 5.97 3.42 9.39 染色体组总长度:57.04um 染色体平均长度:
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