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结核分枝杆菌CFP10-ESAT6融合蛋白的真核表达及其牛结核病诊断价值评价.pdf
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诊断价值评价
时振华+孟闯+徐正中万婷单法陈祥”焦新安“
扬州大学江苏省人兽共患病学重点实验室／江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心，扬州225009
·同等贡献作者
”通信作者，jiao@yzu．edu．on：chenxiang@yzu．edu．cn
摘 要 本研究旨在利用毕赤酵母(Pichia
filter
tuberculosis，MTB)的培养滤液蛋白10(cultureprotein
secreted
antigentarget6，ESAT6)，并评价其作为牛结核病外周血^r一干扰素(interferongamma，IFN一丫)体外
释放实验特异性刺激剂来诊断牛结核病的应用潜能。通过PCR扩增咖10．esat6融合基因，构建
d，取培养上清
pPICZaA一(cfp／o．esat6)重组质粒，电转化毕赤酵母GSll5，添加甲醇至终浓度1．0％，诱导3
核病诊断价值。结果表明，目的蛋白(33
果表明，CFPl0一ESAT6融合蛋白与结核菌素纯蛋白衍生物(purifiedproteinderivative，PPD)作为刺激剂，
蛋白，并表现出更高的生物学活性，在牛结核病外周血IFN-3体外释放实验中可作为候选刺激剂，并能克
服混合感染导致的PPD漏检问题，从而进一步提高检测的敏感性和特异性。
(IFN吖)释放实验
of tuberculosisFusionProtein
EukaryoticExpressionMycobacterium
CFP10-ESAT6andItsPotential inBovine
Application
Detection
FaCHEN Xin-An“
SHIZhen—Hua’MENG WAN SHAN
Chuang+XUZheng-ZhongTmg Xiang“JIAO
of Co-InnovationCenterforPreventionandControlof AnimalInfectiousDiseasesand
JiangsuKeyLaboratoryZoonosis／Jiangsu Important
225009，China
Zoonoses，YangzhouUniversity,Yangzhou
+Theaut
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