对氨基苯胂酸及其氧化物的色谱研究.pdfVIP

对氨基苯胂酸及其氧化物的色谱研究 康 建 马小峰 孟璐露 马东初 沈（阳军区总医院医学实验科 沈阳 110015） 提 要 用紫外分光光度计分析了对氨基苯胂酸 P（ABAA）及其氧化物的光谱特征后，在十八烷基键合相硅胶 柱上，以甲醇-缓冲液作流动相，研究了二者的容量因子随流动相离子强度、柱温、甲醇含量变化的规律。用季铵 盐作离子对试剂，反相离子对色谱法分离PABAA时，分离机理符合离子对机理，在适当条件下，所试验的化合 物都可有所保留。对保留值作出贡献的有固定相排阻作用、分配作用以及居次要地位的PABAA与固定相表面 剩余硅醇基的相互作用。排阻作用及分配作用的相对重要性与流动相中甲醇和离子对试剂的浓度有关。 关键词 对氨基苯胂酸，对氨基苯胂酸氧化物，色谱行为 分类 ? O658/R9 1 前言 作指示剂滴定至蓝色消失为反应终点，经碱性溶液 砷化物能下调白血病细胞BC1-2基因表达，在 萃取后得到PABAA氧化物结晶。反应方程式为： 治疗急性白血病和诱导白血病细胞凋亡研究中已取 得许多新进展[1]对氨基苯胂酸 4-aminobenzene- arsonicacid,PABAA系有机砷，其急性毒性比无 机砷低，砷元素的氧化还原态与化学结构对其药效 影响很大[]，但对色谱行为的影响尚不甚清楚。本实 验 以PABAA为原料，对其还原后的氧化物 4- 3 结果与讨论 aminophenylarsineoxide,PAPAO)进行对照比较， 3.1 紫外吸收光谱特征 采用离子对反相液相色谱分离，辅以紫外求导光谱 将PABAA及PAPAO分别溶于甲醇溶液进行 分析觯探讨 了PABAA及 PAPAO 的光谱特征与色 紫外光谱扫描。根据苯胺衍生物紫外光谱特征选择 谱行为。 扫描范围，在 200 380nm范围内其光谱特征表现 2 材料与方法 为PABAA的最大吸收峰处为254nm，其氧化物的 2.1 仪器与试剂 最大吸收峰处为258nm，后者的整个谱峰比前者呈 高效液相色谱仪LC-10A （日本Shimadzu公 比例后移，见图1-a。纯度定性系根据两个波长下吸 司），配SCL-10A中心控制系统，SPD-10AD紫外检 收比为一常数且与浓度无关[4]，故根据254和270 测器及C-R4A色谱数据处理仪。紫外分光光度计 nm处所测吸收系数比分别为2.13和1.39的结果 Lambda2塑 美（国Perkin-Elmer公司）。 可知，PABAA和PAPAO系不同结构的化合物。三 PABAA 英（国BDH公司）；N,N-二甲基甲酰 阶导数光谱显示二者的光谱特征见图1-b。除240 胺(DMF)Sigma公司)；其它试剂均为分析纯。去离 nm附近有重叠外，其它波长处呈比例位移。不同批 子水经 Millipore纯水器 处理 。 次样品的紫外光谱基本一致，仅在 320nm处有很小 2.2 色谱条件 差异，这可能是由于杂质组分干扰，但主成分不变。 十八烷基键合硅胶柱(NucleosilC18,250mm 3.2 对氨基苯胂酸及其氧化物的色谱行为 ×4.6mmi.d.（中国科学院大连化学物理研究所）。 3.2.1 甲醉的体积分数及pH的影响 PABAA的 流动相 为 v （醇 ）：v （ê 10mmol/L磷 酸二 氢钾 醇羟基和氨基构成较强极性，通常在 甲醇淋洗时需 的水溶液）＝30：70，流速0.8mL/min，检测波长 着重考虑PABAA及PAPAO在柱中的保留时间 254nm,AUFS0.05,温度 30℃。以质量分数为 (tR)。最初用体积分数为90％的甲醇为流动相，二 1 0 % 的 硝